原位分离技术在乳酸发酵中的应用.ppt

原位分离技术在乳酸发酵中的应用膜发酵法萃取发酵法吸附发酵法

发酵过程中产生的乳酸会使发酵液pH值降低，使细胞质酸化，降低微生物发酵活力，目前通用的方法是加入中和剂使乳酸转化为乳酸盐，维持pH在适宜发酵的范围，但除pH外乳酸盐浓度提高也会抑制微生物活性，导致乳酸生产强度降低。发酵法生产乳酸面临的问题

原位产物分离发酵技术是指在发酵进行的过程中，将目标产物或抑制细胞活性的代谢产物快速移出发酵体系的方法。在发酵法生产乳酸过程中引入原位分离技术，可以及时移走乳酸，从而达到减少产物抑制、控制pH的目的，并可以实现连续生产过程。原位产物分离技术

超滤电渗析能够与乳酸发酵结合的原位分离技术膜发酵法萃取发酵法传统萃取剂双水相体系吸附发酵法以吸附树脂、活性炭等为吸附剂

利用具有特定尺度孔径及功能基团的膜，结合压差推动或电势推动等方式，选择性截留或透过特定尺度物质，实现微生物细胞的截留及乳酸提取的方法。通过截留微生物细胞，可以使发酵液中细胞浓度维持较高的水平，而提取乳酸则可以在保留发酵液中营养组分的同时降低产物抑制，从而使发酵液的循环使用成为可能。膜发酵法

膜发酵法实际应用超滤法XAVIER在乳酸发酵过程中使用的管式超滤膜系统优点：细胞拦截率高，膜可在较长的时间内维持稳定的通量；膜组件机械强度高，可使用蒸汽进行灭菌，在长周期发酵中维持性能稳定。缺点：进行细胞循环利用时，发酵底物与培养基成分和乳酸一同留在了澄清发酵液组分中，在进行连续发酵时，反应器中需要不断补充发酵底物与培养基，而分离出的发酵液仍需进一步处理方可得到纯度较高的乳酸。电渗析法电渗析法使用离子交换膜，在电场驱动下，可以使水溶液中离子定向移动。优点：对pH的调控不需要添加中和剂；可有效降低产物抑制，能长时间保持发酵强度；同时简化了乳酸提纯工艺。缺点：微生物细胞容易富集在电渗析膜上，既会杀死微生物细胞，导致发酵强度下降，又会污染电渗析膜，电渗析效率下降。

DANNER等人设计了MBR-ED系统通过超滤膜生物反应器实现细胞循环，并利用单极电渗析箱实现发酵液中乳酸的分离与提纯，并将发酵液中剩余培养基与发酵底物回用于发酵罐中。耦合生物膜反应器与电渗析技术

萃取发酵是通过发酵与萃取分离的耦合，在发酵过程连续将发酵产物转移出发酵体系的耦合发酵技术。与传统的溶剂萃取法相比，萃取发酵法对萃取剂要求更高，主要是要求萃取剂的毒性不能太高，否则会影响细胞活性。减轻萃取剂对细胞的毒害：①用膜拦截细胞；②采用细胞固定化技术；③在固定化载体中包埋植物油，如豆油等。萃取发酵法

YABANNAVAR等使用混合萃取剂（叔胺和油醇），并结合了细胞固定化技术来进行乳酸萃取。CHEN等利用微孔中空纤维膜与萃取发酵结合，萃取剂采用20%叔胺、40%油醇和40%煤油的混合溶剂。当两种聚合物、一种聚合物与一种亲液盐或是两种盐（一种是离散盐，另一种是亲液盐）在适当的浓度或是在一个特定的温度下相混合在一起时就形成了双水相系统。利用双水相系统进行萃取即为双水相萃取法，相对于溶剂萃取对细胞的毒害，双水相萃取具有更高的生物相容性，但投入成本大，萃取效率相对略低。例：聚乙二醇和羟乙基纤维素体系，环氧丙烷与羟丙基淀粉聚合结合物-100体系。萃取发酵法应用实例

利用吸附剂的表面结构或官能团，通过范德华力或化学键作用，从液体或气体中富集目标产物。常用的吸附剂有分子筛、活性炭、吸附树脂以及其他廉价材料等。吸附发酵

活性炭吸附：吸附容量小，选择性差，吸附发酵产物同时吸附一定量的发酵底物，除此以外，不同批次重复性差。离子交换树脂法具有操作量少且简便、易于进行系统控制、吸附容量大且基本不吸附葡萄糖等优势，适用于工业规模的生产。主要利用阴离子交换树脂从发酵液中去除和回收乳酸，弱碱D301阴离子交换树脂、国产商品树脂D354、PVP树脂等均验证可用。马建芳等结合细胞固定化技术与吸附发酵法，使用卡拉胶、聚乙烯醇与海藻酸钠混合液进行细胞固定化，使用吸附装置实现原位分离，该方法不加入中和剂，自动化控制水平高，且得到的乳酸纯度不低于95%。吸附发酵应用实例

总结原位分离技术在移走代谢产物同时不产生更多离子，既解决了产物抑制问题，又省去了中和剂的使用，同时剩余发酵液可以循环进行发酵，为连续发酵乳酸提供技术基础，是今后乳酸工业大规模生产的技术保证。

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