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香菇多糖不仅是一种比较理想的药物,也是一类重要的保健食品功能因子,具有广阔的应用前景,是当今医药和食品工业共同关注的焦点。本课题针对香菇中提取多糖的研究现状,优化香菇多糖提取工艺,提高香菇利用率,该研究有一定的开发前景同时也具有一定的现实意义。实验材料:原料:鲜香菇。药品:无水葡萄糖,苯酚,浓硫酸。仪器设备:电热恒温鼓风干燥箱,微型高速万能粉碎机,电子天平,恒温水浴锅,离心沉淀机,可见紫外分光光度计。实验方法本课题研究热水浸提方法提取条件温和,生产工序简单,工艺简单,易工业化,易操作,得率高,绿色环保。苯酚─硫酸比色法:苯酚─硫酸可与游离的寡糖、多糖中的己糖、糖醛酸(或甲苯衍生物)起显色反应,己糖在490nm处(戊醇及糖醛酸在480nm)有最大吸收值,吸收值与含量呈线性关系。标准曲线的绘制:配制0,10,20,30,40,50,60,70μg/mL的葡萄糖标准溶液。分别将各种浓度的葡萄糖标准溶液移取1.0mL,分别加入3%的苯酚溶液1.0mL,然后迅速加入浓硫酸4.5mL,静置10min,摇匀,加蒸馏水定容至25mL,在室温下放置20min。在490nm处测吸光度,质量浓度为横坐标,以吸光度为纵坐标,绘制标准曲线,并求回归方程。无水葡萄糖标准曲线
分析:从1:10到1:20多糖得率随料液比的增大而增加。这可能是因为香菇中多糖分散存在于由纤维组成的骨架里,溶剂对多糖的提取必须使多糖扩散到骨架内部先将其溶解,然后才能扩散出来。其次,当料液比高于1:20时,多糖得率随料液比增大而减小,其原因可能是多余的提取剂也可以破坏香菇细胞,使得细胞膜受到损害,造成细胞液或者其它的成分溶出,这样溶液的颜色会发生不应该的改变而致使测定结果降低。同时,加水量过大,会使提取液中多糖浓度偏低。浸提温度对多糖得率的影响温度55℃,65℃,75℃,85℃,95℃,料液比1∶20,时间1h,提取一次。提取时间对多糖得率的影响提取时间1,1.5,2,2.5,3,3.5,4h,料液比1∶20,温度85℃,提取一次。提取次数对多糖得率的影响料液比1:20,提取温度85℃,浸提时间3.5h的条件下,提取1、2、3、4、5次。在单因素试验的基础上,选用料液比、浸提温度、提取时间、提取次数为考察因素,进行4因素3水平正交试验,以全面研究这四个因素的正交作用对香菇中多糖热水浸提的影响,从而确定最佳提取条件。正交实验分析四个因素中影响多糖得率的主次关系依次是:提取次数(D)>提取时间(C)>料液比(A)>浸提温度(B)。从平均值看,香菇中多糖热水浸提的最佳条件为:D1,即料液比1∶20、浸提温度85℃、提取时间4h、提取次数为2。按此组合进行试验,并按照绘制标准曲线的方法用紫外分光光度计检测A490nm值,计算所得香菇中的多糖得率为2.61%。所得的结果和单因素的结果不一致。在料液比1:20,温度85℃下能最优的提取多糖,在A2B2条件下3.5h没有充分浸提,还有少量香菇多糖没有浸提出来,4h能更多的浸提出香菇多糖,因此提取时间定为4h。在A2B2C3条件下浸提两次就能得到很多的香菇多糖,在提取第三次效果不明显而且还很浪费时间和资源,又因为香菇多糖的还原性又比较强,若提取次数过多反而会被空气中的氧气氧化,使多糖的氧化加重或发生降解反应,因此把提取次数定为2次。单因素的实验结果为:提取时间3.5h,浸提温度85℃,料液比1:20,提取次数3。通过单因素和正交试验方法研究香菇多糖热水浸提工艺参数,找出各因素的最佳组合得到:香菇中多糖提取最佳工艺参数为:料液比1∶20、温度85℃、提取时间4h和提取次数为2次。在最佳工艺条件下香菇中多糖的得率为2.61%。四个因素中影响多糖得率的主次关系依次是:提取次数>提取时间>料液比>浸提温度。系别:生命科学系 学科专业:食品科学与工程姓名:李中平指导教师:郭艳茹六致谢五结论四正交实验三单因素实验二材料及方法一简介论文结构料液比对多糖得率的影响料液比1∶10,1∶20,1∶30,1∶40,温度85℃,时间1h,提取一次。分析:温度在65℃到85℃之间多糖得率随提取温度升高而增加。原因是随着温度的升高,多糖在溶剂中的溶解度及扩散系数均会增大,也就是说多糖从香菇中被提取出来的速度将变快,这是有利于多糖提取的。但当温度高于85℃时,得率明显降低。这是由于高温同样会加速多糖的氧化,当提取温度超过一定值后,扩散速度的增加已经比不上多糖被损害的速度,多糖的得率反而会随温度升高而下降。因此,浸提温度应选择85℃分析:在3.5h之前多糖得率随提取
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