LS_T 6132-2018 粮油检验储粮真菌的检测孢子计数法.docxVIP

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中华人民共和国粮食行业标准

LS/T6132—2018

粮油检验储粮真菌的检测孢子计数法

Inspectionofgrainandoils—Storagefungalexamination—Enumerationsporesoffungi

2018-01-08发布2018-03-01实施

国家粮食局发布

I

LS/T6132—2018

前言

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由国家粮食局提出。

本标准由全国粮油标准化技术委员会(SAC/TC270)归口。

本标准起草单位：国家粮食局科学研究院、国家粮食局标准质量中心、湖北省粮油食品质量监测站、河南省粮油饲料产品质量监督检验站、安徽省粮油产品质量监督检测站、山东省粮油检测中心。

本标准主要起草人：唐芳、程树峰、朱之光、曹阳、欧阳毅、张海洋、祁智慧、熊宁、尹成华、季一顺、姜洪、李琦、胡斌、胡纪鹏、尹豪。

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LS/T6132—2018

粮油检验储粮真菌的检测孢子计数法

1范围

本标准规定了粮食储藏过程中生长真菌的检测方法。

本标准适用于小麦、稻谷、玉米和大豆原粮储存过程中可生长真菌的检测。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T29890粮油储藏技术规范

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。3.1

储粮真菌storagefungi

粮食储藏过程中，籽粒上生长的真菌，主要是霉菌，其中曲霉和青霉危害严重。储藏初期对粮食造成危害的主要是灰绿曲霉和白曲霉。

3.2

储粮真菌分生孢子conidiosporeofstoragefungi

储粮真菌生长繁殖过程中，会产生一种生于细胞外的无性孢子，称之为分生孢子。分生孢子因真菌种类而有差异，是真菌鉴定的依据之一。

3.3

灰绿曲霉AspergillusglaucusG.

粮食上常见曲霉，是粮食储藏期间初期侵染粮粒的重要霉菌。具有干生性的特点，能在高渗透压的基质上旺盛发育，孢子萌发的最低相对湿度在65%～80%。因其生长对温度的要求不高，能侵害低水分含量(14.5%以下)粮食，可以侵入和杀死种胚，使粮食丧失发芽力和变色，导致粮食变质。

3.4

白曲霉Aspergilluscandidus

陈粮中常见曲霉，腐生性强，是导致粮食霉变发热的主要危害霉菌。中温性和干生性，孢子萌发最低相对湿度75%左右，主要侵染水分含量为15.0%左右的谷物，会引起发芽率下降和粮食霉变。

4原理

储粮真菌会产生一定数量的分生孢子。用水将试样中的孢子洗脱下来，在规定条件下，通过显微镜计数，检测孢子的数量。孢子的数量反映了储粮生霉的状况，是粮食储藏安全的重要指标。

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LS/T6132—2018

5试剂和仪器

5.1天平：感量0.1g。

5.2生物显微镜：目镜10×,物镜10×~60×。

5.3血球计数板：规格为25个中方格，V等于0.1mm3,计数板结构参见A.1。

5.4盖玻片：20mm×20mm。

5.5具塞试管：50mL。

5.6滤布：网孔300目，尺寸10cm×10cm。

5.7计数器：计数范围为0～9999,转动式回零。

5.8胶头滴管：长度大于200mm。

5.9实验用水：符合GB/T6682国家实验室三级水标准，检测前需在显微镜下镜检，确认实验用水显微镜视野无杂物干扰即可使用。

6扦样

按照GB/T29890的扦样要求，打取粮食样品需单独存放，每份样品200g,于自封袋密封保存。样品在保存和运输的过程中，应采取必要的措施防止样品中原有微生物发生数量变化，保持样品的原有状态。

7操作步骤

7.1孢子洗脱

称样前将样品混合均匀，准确称取10.0g原始样品于具塞试管(5,5)中，加入30mL水(5.9),加塞，上下剧烈振荡1min,振荡频率为每分钟120次~150次，用300目滤布(5.6)过滤，收集滤液于具塞试管中(5.5)备用。

7.2孢子计数

7.2.1血球计数板准备；加样前，对血球计数板(5.3)计数室进行镜检，若有污物，需清洗吹干后使用。

7.2.2点样品：在计数板(7.21)计数室上加盖一块盖玻片(