一代、二代、三代基因测序技术的发展历史及应用.pptxVIP

一代、二代、三代基因测序技术

的发展历史及应用;目录

CONTENT;基因测序技术也称作DNA测序技术，即获得目的DNA片段碱基排列顺序的技术，获得目的DNA片段的序列是进一步进行分子生物学研究和基因改造的基础。;1977年，WalterGilbert和FrederickSanger发明了第一台基因测序仪，并应用其测定了第一个基因组序列，噬菌体X174，全长5375个碱基。WalterGilbert和FrederickSanger也因在测序技术中的贡献获得了1980年诺贝尔化学奖。

Sanger所发明的测序方法被称为第一代测序技术，该技术直到现在依然被广泛使用，但是其一次只能获得一条长度在700～1000个碱基的序列，无法满足现代科学发展对生物基因序列获取的迫切需求。;毛细管电泳技术的原理;完整的测序过程分为4步：

1.DNA变性，形成单链；

2.DNA聚合酶结合；

3.dNTP中混有低比例的ddNTP，得到不同位置终止的序列；

4.凝胶电泳获得序列：对得到的序列进行凝胶电泳，得到一张色谱图，根据碱基的顺序和位置确定序列信息。;BigDye直接循环测序试剂盒的测序步骤更少，操作时间更短,将PCR清洗和循环测序结合到一个步骤中，时间缩短40%。;仪器名称;第一代测序技术的应用：

PCR产物测序：对目的基因的PCR产物进行测序，得到目的基因序列；（如科研机构克隆拟