免疫诊疗和防治专家讲座.pptx

第七章免疫诊疗与防治

;第一节免疫诊疗;(二)抗原与抗体检测方法;;2、沉淀反应;单向免疫扩散;;双向免疫扩散;在双扩基础上加电泳，Ag孔置负极端，Ab孔置正极端，Ag带负电荷多于Ab，向正极泳动，Ab由正极向负极泳动，形成对流，百分比适宜处形成沉淀线，为对流电泳。;免疫标识技术;(1)免疫荧光法：①直接法②间接法;;抗核抗体(FITC-IgG）);;抗原抗体反应特异性

酶催化反应高效性;ELISA;;;免疫印迹法;;;;二、免疫细胞及其功效检测;外周血单个核细胞分离;外周血单个核细胞分离;血液中PBMC密度与其它成份不一样：

血小板密度为1.030～1.035，

粒细胞为1.092，

红细胞为1.093，

淋巴细胞和单核细胞密度为1.075～1.090。

利用一个密度介于1.075～1.092之间、近于等渗溶液(分层液)进行密度梯度离心，可使不一样类别血细胞按其对应密度分布，从而被分离。

惯用分层液有聚蔗糖-泛影葡胺分层液法和Ficol分层液法两种。;单核细胞取得;淋巴细胞亚群分离;E花结试验

T细胞表面CD2分子+绵羊血红细胞→玫瑰花结;尼龙棉柱分离法;免疫磁珠分离法;磁分离技术原理：;流式细胞术(FlowCytometry,FCM)

是七十年代发展起来高科学技术,它集计算机技术、激光技术、流体力学、细胞化学、细胞免疫学于一体,同时含有分析和分选细胞功效。它不但可测量细胞大小、内部颗粒性状,还可检测细胞表面和细胞浆抗原、细胞内DNA、RNA含量等,在血液学、免疫学、肿瘤学、药品学、分子生物学等学科广泛应用。;流式细胞仪试验方法;?细胞分选;细胞凋亡研究;;血液学应用：包含DNA倍体分析及细胞周期分析，淋巴细胞亚群测定，白血病免疫分型，淋巴瘤免疫分型，红细胞疾病诊疗，血小板功效分析和血小板病诊疗，微小残留白血病检测，白细胞吞噬功效测定，NK和LAK细胞活性测定，造血干/祖细胞测定等;胞内细胞因子检测：;淋巴细胞功效检测;1、T细胞功效检测;（一）T细胞增殖试验;;惯用刺激物;检测T细胞增殖反应;1．形态学检验法;转化率在一定程度上可反应细胞免疫功效，正常人T细胞转化率为60%～80%，小于50%可视为降低。

形态学方法简便易行，普通光学显微镜便能观察结果，适于基层试验室应用。缺点是依靠肉眼观察形态学改变，判断结果易受主观原因影响，重复性和准确性较差。

;2、B细胞功效检测;3、NK细胞活性测定;4、?吞噬细胞功效检测;NBT还原试验;第二节免疫防治;天花;患天花小儿（Infantwithsmallpox）?;脊髓灰质炎;中毒;Jenner和Pasteur,著名免疫学家，公认为免疫接种和主动免疫先驱。;疫苗接种实际效果;一、免疫预防

（immunoprophylaxis）;免疫预防;;1、安全

活疫苗要求遗传形状稳定，无返祖，无致癌性，

无热原性及过敏原。

2、有效

大多数人有保护性免疫，群体抗感染能力强。

理想疫苗：诱导体液和细胞免疫

维持时间长

3、实用

接种程序简化如：口服疫苗

无不适反应

易保留和运输;疫苗应用;;;新型疫苗及其发展;基因工程疫苗

*重组抗原疫苗：用DNA重组技术制备只含保护性抗原纯化疫苗。疫苗不含活病原体和病毒核酸，安全有效，成本低

*重组载体疫苗：将编码病原体有效免疫原基因插入载体

（病毒或细菌）基因中，接种后随疫苗株在体内增殖而表示抗原

*DNA疫苗：将编码病原微生物有效免疫原基因插入到细菌质粒DNA中，建成重组质粒，再将其导入组织细胞，使其表示保护性抗原，产生特异性免疫。如：HIV疫苗

;*转基因植物疫苗：将编码病原生物有效蛋白抗原基因和高表示质粒一同植入到植物基因中，产生转基因植物，食用后能产生免疫力

*细胞因子基因工程疫苗：将一些细胞因子（如IL-2、4、IFN-r、TNF等）导入肿瘤细胞，诱发肿瘤抗原递呈，活化肿瘤特异性淋巴细胞，到达抗瘤目标

;依据一些特定传染病疫情监测和人群免疫情况分析，按要求程序有计划地进行人群预防接种，到达控制和毁灭传染病目标，称计划免疫。

;;第二节、免疫治疗;免疫系统;1.免疫治疗基本概念;2.分类：;免疫治疗方法;分子

治疗;;;;三、生物应答调整剂与免疫抑制剂;免疫抑制剂能抑制机体免疫功效，惯用于预防移植排斥反应发生和本身免疫病治疗。包含化学合成药品(糖皮质激素、环磷酰胺、硫唑嘌呤)、