SNT 0176-2013 出口食品中蜡样芽胞杆菌检测方法.docx

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准

SN/T0176—2013

代替SN0176—1992

出口食品中蜡样芽胞杆菌检测方法

DeterminationofBacilluscereusinfoodsforexport

2013-03-01发布2013-09-16实施

中国家华质量人监检验共检总发布

I

SN/T0176—2013

前言

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

本标准代替SN0176—1992《出口食品中蜡样芽孢杆菌检验方法》。

本标准与SN0176—1992相比，主要技术变化如下：

发布单位改为“中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局”,标准名称改为“出口食品中蜡样芽胞杆菌检测方法”;

——增加前言；

—“主要内容与适用范围”改为“范围”,内容修改为“本标准规定了出口食品中蜡样芽胞杆菌的检验方法。本标准适用于食品中蜡样芽胞杆菌的检验”;

———增加检验流程图；

——结构上变化，将SN0176—1992中的两种方法分为“第一法”和“第二法”;

增加了稀释液“0.85%生理盐水”:

——将取样量“50g”修改为“25g”;

———增加计数公式

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——将培养温度30℃改为30℃±1℃;

——将证实试验的培养温度由30℃改为36℃±1℃;

——增加了API50CHB诊断试剂条和VITEK全自动微生物鉴定系统；——“补充件”改为“规范性附录”。

本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。

本标准起草单位：中华人民共和国黑龙江出入境检验检疫局。本标准主要起草人：张泓、刘新亮、庞均予、李铁柱、高勇。

本标准所代替标准的历次版本发布情况为：———SN0176—1992。

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SN/T0176—2013

出口食品中蜡样芽胞杆菌检测方法

1范围

本标准规定了出口食品中蜡样芽胞杆菌的检测方法。本标准适用于食品中蜡样芽胞杆菌的检测。

2设备和材料

2.1烘干箱：180℃。

2.2培养箱：30℃±1℃和36℃±1℃。

2.3厌氧培养箱：36℃±1℃。

2.4水浴锅：46℃±1℃。

2.5pH计：25℃测量，精度±0.1pH单位。

2.6旋转混合器。

2.7培养皿：直径90mm或100mm或者是140mm。

2.8吸量管：容量10.0mL和1.0mL,具0.5mL和0.1mL刻度。

2.9显微镜。

2.10微量移液器：容量10.0ml和1.0mL,具0/1mL刻度。

2.11均质器：拍击式或蠕动式。

2.12高压蒸汽灭菌器。

2.13API50CHB或VITEK全自动微生物鉴定系统”

3培养基和试剂

3.1甘露醇卵黄多粘菌素琼脂(MYP):见附录A中A.1。

3.2胰蛋白胨大豆多粘菌素肉汤(TSRB):见A.2。

3.3胰蛋白胨大豆羊血琼脂平板(TSSB):见A.3。

3.4酚红葡萄糖肉汤：见A.4。

3.5硝酸盐肉汤：见A.5。

3.6营养琼脂：见A.6。

3.7L-酪氨酸营养琼脂：见A.7。

3.8溶菌酶营养肉汤：见A.8。

3.9改良V-P培养基：见A.9。

3.10动力培养基：见A.10。

3.11磷酸盐缓冲液：见A.11。

1)API50CHB和VITEK全自动微生物鉴定系统由法国生物梅里埃公司提供的产品的商品名。给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对该产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效的产品。

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SN/T0176—2013

3.12碱性复红液：见A.13。

3.130.85%生理盐水：见A.14。

3.14亚硝酸盐试剂：见A.15。

3.15V-P试剂：见A.16。

第一法蜡样芽胞杆菌平板计数法

4检验程序

蜡样芽胞杆菌平板计数法的检测程序见图1。

25

25g(mL)样品+225mL稀释液，均质

10倍系列稀释

每皿中加入15mL~20mLMYP琼脂，取适当稀释倍数的0.1mL样品匀液，加入培养皿，涂布。30℃±1℃24h

选取3~5个典型菌落

计算和报告

L1酪氨酸分解试验

蛋白毒素结晶试验

葡萄糖发酵试验

硝酸盐还原试验

溶菌酶试验

溶血试