GB∕T 16550-2020 新城疫诊断技术.docxVIP

ICS11.220B41

中华人民共和国国家标准

GB／T16550—2020代替GB/T16550—2008

新城疫诊断技术Diagnostictechniquesfornewcastledisease

2020-12-14发布2020-12-14实施

国家市场监督管理总局国家标准化管理委员会

发布

Ⅰ

GB／T16550—2020

前言

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

本标准代替GB/T16550—2008《新城疫诊断技术》，与GB/T16550—2008相比，主要技术变化如下：

—修改了血凝和血凝抑制试验判定结果（见7.3和7.4,2008年版的5.3和6.3);

—删除了毒力评价指标中MDT和IVPI（见2008年版的4.3和4.4);

—增加了实时荧光RT-PCR检测方法（见第9章）。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

本标准由中华人民共和国农业农村部提出。

本标准由全国动物卫生标准化技术委员会(SAC/TC181)归口。

Ⅱ

GB／T16550—2020

引言

新城疫(Newcastledisease,ND)是由新城疫病毒(Newcastlediseasevirus,NDV)强毒株感染禽类

引起的一种急性、烈性传染病，给世界养禽业造成巨大的经济损失。世界动物卫生组织(OIE)将新城疫列为法定报告的动物疫病，我国农业农村部将其列为一类动物疫病。

新城疫病毒可感染240多种禽类，其中家鸡和珠鸡最易感，感染禽（野鸟）及带毒禽（野鸟）系主要的传染源。新城疫病毒主要经消化道和呼吸道传播，被污染的水、饲料、蛋托（箱）、种蛋、鸡胚和带毒的野生飞禽、昆虫及有关人员等均可成为传播媒介。

新城疫病毒属于副黏病毒科(Paramyxoviridae)、正禽腮腺炎病毒属(Orthoavulavirus),目前新城

疫病毒只有一种血清型，但可分为多种基因型。OIE规定，新城疫是由新城疫病毒强毒株引起的禽类感染，因此，对于新城疫的诊断，除了鉴定新城疫病毒之外，还需要对其致病性进行评估。对于致病性评估的方法，可通过1日龄SPF鸡ICPI进行测定，也可通过分子生物学技术，如RT-PCR结合序列测定等。根据新城疫病毒F基因部分序列(47nt~420nt)差异，可将新城疫病毒分为ClassⅠ和ClassⅡ两大类，其中ClassⅠ在国内均系弱毒株，因此，针对ClassⅠNDV的检测方法不具有诊断意义，本标准所涉及的诊断方法均针对ClassⅡ新城疫强毒株。

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GB／T16550—2020

新城疫诊断技术

1范围

本标准规定了新城疫的临床诊断、病毒分离与鉴定、血凝和血凝抑制试验、反转录聚合酶链式反应

(RT-PCR)和实时荧光RT-PCR(Real-timeRT-PCR)的技术要求。

本标准适用于新城疫的诊断、检疫、检测、监测和流行病学调查等。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB19489实验室生物安全通用要求

NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范NY/T1948兽医实验室生物安全要求通则

3缩略语

下列缩略语适用于本文件。

Ct值：每个反应管内的荧光信号量达到设定的阈值所经历的循环次数(Cyclethreshold)DEPC：焦碳酸二乙酯(Diethypyrocarbonate)

HA：血凝(Hemagglutinin)

HI：血凝抑制(Haemagglutinationinhibition)

ICPI：脑内接种致病指数(Intracerebralpathogenicityindex)ND：新城疫(Newcastledisease)

NDV：新城疫病毒(Newcastlediseasevirus)

PBS：磷酸盐缓冲液(Phosphatebufferedsaline)

RBC：鸡红细胞悬液(Redbloodcell)RNA：核糖核酸(Ribonuclei