SNT 1961.15-2013 出口食品过敏原成分检测 第15部分：实时荧光PCR方法检测芹菜成分.docxVIP

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准

SN/T1961.15—2013

出口食品过敏原成分检测第15部分：实时荧光PCR方法检测芹菜成分

Detectionofallergencomponentsinfoodforexport—

Part15:RealtimePCRmethodfordetectingcelerycomponents

2013-03-01发布2013-09-16实施

中国家量人监检检总发布

SN/T1961.15—2013

前言

SN/T1961《出口食品过敏原成分检测》共分为19部分：——第1部分：酶联免疫法检测花生成分；

——第2部分：实时荧光PCR法检测花生成分；

第3部分：酶联免疫吸附法检测荞麦蛋白成分： 第4部分：实时荧光PCR方法检测腰果成分：

——第5部分：实时荧光PCR方法检测开心果成分；——第6部分：实时荧光PCR方法检测胡桃成分；

——第7部分：实时荧光PCR方法检测胡萝卜成分；——第8部分：实时荧光PCR方法检测榛果成分；——第9部分：实时荧光PCR方法检测杏仁成分；——第10部分：实时荧光PCR方法检测虾/蟹成分；——第11部分：实时荧光PCR方法检测麸质成分；——第12部分：实时荧光PCR方法检测芝麻成分；——第13部分：实时荧光PCR方法检测小麦成分；——第14部分：实时荧光PCR方法检测鱼成分；

——第15部分：实时荧光PCR方法检测芹菜成分；

第16部分：实时荧光PCR方法检测芥末成分——第17部分：实时荧光PCR方法检测羽扇豆成分；——第18部分：实时荧光PCR方法检测荞麦成分；

——第19部分：实时荧光PCR方法检测大豆成分。本部分为SN/T1961的第15.部分。

本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。

本部分起草单位：中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局、深圳大学。本部分主要起草人：陈颖、曹际娟、郑秋月、吴亚君、徐君怡、刘晓宇、吴海强、袁飞、徐宝梁。

工

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出口食品过敏原成分检测第15部分：实时荧光PCR方法检测芹菜成分

1范围

SN/T1961.15的本部分规定了食品致敏原芹菜成分的实时荧光PCR检测方法。本部分适用于食品及其原料中致敏原芹菜成分的定性检测。

本部分在测定芹菜原料产品时参考的测定检测限(LOD)为1mg/kg,在测定植物源性食品时参考的测定检测限(LOD)为10mg/kg。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T27403实验室质量控制规范食品分子生物学检测

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

Ct值cyclethreshold

每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值时所经历的循环数。

3.2

致敏原芹菜成分allergencelerycompound

致敏原又称过敏原或变态反应原，是指能够使人发生过敏的抗原，芹菜是光敏性蔬菜，过量食用后，体内的光敏性物质达到一定浓度时、经过阳光照射，就容易导致光敏性物质代谢障碍，诱发皮炎。本标准中致敏原芹菜成分即指芹菜特异性DNA片段。

4方法提要

样品经研磨后，提取DNA,以DNA为模板，采用芹菜的管家基因(Mtd)特异性检测引物和探针进行实时荧光PCR扩增，观察实时荧光PCR的增幅现象，判断样品中是否存在过敏原芹菜成分。

5试剂与材料

除另有规定外，试剂为分析纯或生化试剂，实验用水符合GB/T6682的要求。

5.1CTAB缓冲液：55mmol/LCTAB,1400mmol/LNaCl,20mmol/LEDTA,100mmol/LTris,用10%盐酸调pH至8.0,121℃,高压灭菌20min,备用。

5.2TE缓冲液(Tris-Cl、EDTA缓冲液):10mmol/LTris-HCl(pH8.0),1mmol/LEDTA(pH8.0)。

2

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5.3蛋白