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ICS07.080
CCSA40
团体标准
T/CAB
醇脱氢酶活力的测定分光光度
法
Determinationoftheactivityof
alcoholdehydrogenase—
Spectrophotometricmethod
（征求意见稿）
20XX-XX-XX发布20XX-XX-XX实施
中国产学研合作促进会发布
T/CAB
目次
前言III
1范围1
2规范性引用文件1
3术语和定义1
4原理1
5试剂1
6仪器设备2
7试样制备和试验步骤2
7.1试样酶液的制备2
7.2测定2
8试验数据处理2
8.1液体样品2
8.2固体样品3
9精密度3
II
T/CAB
醇脱氢酶活力的测定分光光度法
1范围
本文件描述了测定醇脱氢酶活力的分光光度法。
++
本文件适用于生化试剂、工业酶制剂中依赖辅酶NAD或NADP的醇脱氢酶活力的测
定。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期
的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件。不注日期的引用文件，其最新版本（包括
所有的修改单）适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
醇脱氢酶活力单位alcoholdehydrogenaseactivityunit
在30℃、pH8.5的条件下，每分钟氧化1μmol乙醇生成乙醛所需的酶量为一个酶活力单
位，单位为U。
4原理
醇脱氢酶催化底物乙醇的氧化生成乙醛，此过程依赖于尼克酰胺辅酶NAD(P)+，
+-1-1
NAD(P)在340nm下无吸收，而NAD(P)H有吸收，其ε=6.22mMcm，通过监测340nm
340
下吸光度的变化来测定NAD(P)H的生成从而计算乙醇的消耗速率，计算酶活力。
5试剂
除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的二级水。
5.1乙醇：CAS号64-17-5，纯度≥99.8%。
5.2尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）：CAS号53-84-9，纯度≥98%。
1
T/CAB
5.3尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP+）：CAS号24292-60-2，纯度≥97%。
5.4三羟基甲基氨基甲烷（Tris）-HCl缓冲液：50mmol/L，pH8.5。
++
5.5反应底物溶液
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