NYT2251-2012 香蕉花叶心腐病和束顶病病原分子检测技术规范.pdfVIP

ICS65.020

B16

中华人民共和国农业行业标准

NY/T2251一2012

香蕉花叶心腐病和束顶病病原分子检测

技术规范

Technicalspecificationofmoleculardetectionforpathogenofbananamosaicand

heartrotdiseaseandbunchytopdisease

2012-12-07发布2013-03-01实施

中华人民共和国农业部发布

NY/T2251-2012

目U

本标准按照GB/T1.1给出的规则起草。

本标准由农业部农垦局提出。

本标准由农业部热带作物及制品标准化技术委员会归口。

本标准起草单位：中国热带农业科学院环境与植物保护研究所。

本标准主要起草人：黄俊生、彭军、杨腊英、王国芬、梁昌聪、郭立佳、刘磊。

I

NY/T2251-2012

香蕉花叶心腐病和束顶病病原分子检测技术规范

1范围

本标准规定了香蕉花叶心腐病和柬顶病病原的分子检测方法。

本标准适用于香蕉组培培养物、种苗及大田植株上的花叶心腐病和柬顶病病原的定性检测。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注目期的版本适用于本文

件。凡是不注目期的引用文件，其最新版本〈包括所有的修改单）适用于本文件。

SNIT1193基因检验实验室技术要求

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

黄瓜花叶病毒香蕉株系cucumbermosaicvirus,CMV

引起香蕉花叶心腐病的病原物。该病毒的分类地位、寄主范围、地理分布及其为害症状参见附录

A。

3.2

香蕉束顶病毒bananabunchytopvir邸，BBTV

引起香蕉束顶病的病原物。该病毒的分类地位、寄主范围、地理分布及其为客症状参见附录A。

3.3

外壳蛋白基因coatproteingene,CPgene

编码病毒外壳蛋白的基因。

3.4

复制酶基因replicasegene

编码病毒复制酶的基因。

3.5

聚合酶链式反应polymerasechainreaction1PCR

模板基因序列先经高温变性成为单链，在DNA聚合酶作用和适宜的反应条件下，根据模板序列设

计的两条引物分别与模板DNA两条链上相应的一段互补序列发生退火而互相结合，接着在DNA聚合

酶的作用下以网种脱氧核糖核酸CdNTP）为底物，使引物得以延伸，然后不断重复变性、退火和延伸这

一循环，使欲扩增的基因片段以几何倍数扩增。

3.6

逆转录聚合酶链式反应reversetranscription-polymerasechainreaction1RT-PCR

RT-PCR是先利用依赖于RNA的DNA聚合酶，将待测RNA逆转录为cDNA；再以逆转录后的一

段DNA作为模板．以模板DNA两端序列互补的一对特异性寡核音酸序列作为引物，在囚种脱氧核糖

核音三磷酸存在下，利用依赖于DNA的DNA聚合酶的催化作用。经过数十次变性、退火和延伸的反

应循环，使模板上介于两个引物之间的DNA片段得到特异性的技术扩增，再通过电泳等手段检测到被

特异性扩增的片段。