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第1页,共29页,星期日,2025年,2月5日基因工程:即。通俗的说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,地改造生物的。原理:操作水平:结果:一、基因工程基因重组DNA分子水平定向地改造生物的遗传性状,获得人类所需要的品种。基因拼接技术或DNA重组技术定向遗传性状第2页,共29页,星期日,2025年,2月5日1、基因工程的限制性核酸内切酶(限制酶)主要存在于微生物一种限切酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定切点切割DNA分子特点:来源:作用于:“”磷酸二酯键二、基因操作的工具第3页,共29页,星期日,2025年,2月5日CTTCATGAATTCCCTAAGAAGTACTTAAGGGATTGGCATCTTAAAATTCCGTAGEcoRI剪切目的基因CTTCATGAATTCCCTAAGAAGTACTTAAGGGATTGGCATCTTAAAATTCCGTAG目的基因黏性末端第4页,共29页,星期日,2025年,2月5日被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端?思考:形成的黏性末端不同不同的限制酶呢?具有第5页,共29页,星期日,2025年,2月5日2、基因工程的DNA连接酶“”作用:将互补配对的两个粘性末端连接起来,使之成为一个完整的DNA分子第6页,共29页,星期日,2025年,2月5日使用DNA连接酶制作重组DNA分子甲片段CTTCATGAATTCCCTAAGAAGTACTTAAGGGATT乙片段GGCATCTTAAAATTCCGTAGGGCATCTTAAAATTCCGTAGDNA连接酶的作用位点是:相邻的两个脱氧核苷酸的切口。即生成:磷酸二酯键。第7页,共29页,星期日,2025年,2月5日3、基因的运载体(2)条件①能够在宿主细胞中复制并稳定地保存②具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接③具有标记基因,便于进行筛选(1)常用的运载体:质粒、噬菌体和动、植物病毒等第8页,共29页,星期日,2025年,2月5日标记基因,便于进行检测。质粒存在于许多细菌和酵母菌等生物中,是能够自主复制的很小的环状DNA分子。第9页,共29页,星期日,2025年,2月5日第一步:第二步:获取目的基因目的基因与运载体结合注意:要用同一种限制酶切取目的基因和运载体,并用DNA连接酶连接。三、基因工程基本步骤第10页,共29页,星期日,2025年,2月5日第三步:第四步:将目的基因导入受体细胞目的基因的检测和表达1、常用的受体细胞:微生物,动植物细胞等2、常用微生物作受体细胞的原因:微生物增殖快、代谢快、目的产物多一般检测:标记基因是否表达第11页,共29页,星期日,2025年,2月5日处理的受体细胞中真正摄入了目的基因的很少,必须将它从中检测出来。将每个受体细胞单独培养形成菌落,检测菌落中是否有目的基因的表达产物。淘汰无表达产物的菌落,保留有表达产物的进一步培养、研究。无表达产物无表达产物有表达产物无表达产物第12页,共29页,星期日,2025年,2月5日第13页,共29页,星期日,2025年,2月5日抗虫棉抗CMV甜椒抗虫原理?抗虫结果?四、基因工程的应用1、基因工程与作物育种第14页,共29页,星期日,2025年,2月5日抗虫转基因植物第15页,共29页,星期日,2025年,2月5日生长快、肉质好的转基因鱼(中国)乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷)第16页,共29页,星期日,2025年,2月5日转黄瓜抗青枯病基因的甜椒转鱼抗寒基因的番茄第17页,共29页,星期日,2025年,2月5日2、基因工程与药物研制我国生产的部分基因
工程疫苗和药物许多药品的生产是从生物组织中提取的。受材料来源限制产量有限,其价格往往十分昂贵。微生物生长迅速,容易控制,适于大规模工业化生产。
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