喜树根器官培养和抗癌物质生成的研究 (3).docVIP

喜树根器官培养和抗癌物质生成的研究

作品简介：我国特有树种喜树（CamptothecaacuminataDecne）产生的喜树碱（Comptothecin,CPT）为一种拓扑异构酶Ⅰ（TopoⅠ）的抑制剂，对30余种肿瘤均有明显疗效,且毒副作用小,具有极高的临床应用价值。由于长期以来过度采伐生态环境的改变以及人工规模化栽培的滞后等原因,目前喜树药用资源的供应十分紧缺。

生物技术可以创造合适的理化条件使植物的细胞或器官进行高效率的次生代谢物质合成。因此，生物技术的应用将有可能解决喜树资源匮乏的问题，生产出更多的CPT应用于临床治疗。本研究从无菌培养种子胚胎开始，在取得大量的无菌苗后，切取活力高和质量均匀的根作为试验材料。研究采用液体悬浮培养的方法，对影响喜树离体根器官增殖生长的多种因素进行了探讨，并在此基础上，通过组织化学技术和薄层色谱技术（TLC）进行了CPT的定性和定量分析。实验发现，离体培养的根器官不仅具有生成CPT的能力，而且在离体培养的根器官中的CPT含量还高于非离体的根。这个结果为根作为CPT的合成场所提供了直接的证据，也表明合成的CPT在向外输送的渠道被切断的情况下可以积累至高于通常根细胞的CPT水平而不会对细胞自身造成不利的影响，这一点具有重要的理论价值。试验结果还表明，喜树离体根能够很好地适应液体培养的环境条件，根器官的增殖生长和CPT的生成积累可以通过培养条件的改变进行有效的调控。这些研究结果为应用生物技术大量培养离体根生产CPT提供了重要的理论和事实依据。