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乙型肝炎的实验室诊断

乙型肝炎的实验室诊断

[血清标志物]对于乙肝的病原学诊断最初、也是最常用的是乙肝病毒血清标志物(HBVM)检测。HBVM主要包括:两对半(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb)、HBxAg、HBxAb、前S抗原及抗体、DNA多聚酶(DNA-P)及抗体等。通过检测HBVM可以间接的多角度了解患者HBV感染、复制以及病情恢复情况。常用血清标志物是两对半,临床意义如下:1.表面抗原(HBsAg):位于病毒外壳表面,由HBV基因组S区和前S区基因编码,完整的大分子HBsAg是完整病毒的必需条件。血清HBsAg的出现,意味着HBV的现症感染,是乙肝血清学检查最重要的指标。HBsAg虽然只是HBV存在的间接指标,但诊断乙肝的最常用也是最重要的指标,主要因它出现最早,一般在感染后3周出现,有利于早期诊断。第二,它持续时间长,急性患者至少持续5周,最长可持续5个月,并且在血液中的释放量大,非常容易检测。前S1和前S2紧随HBsAg而出现在血流中,并与HBeAg和HBV-DNA相关。

2.表面抗体(HBsAb):由于病毒HBsAg抗原性诱发机体产生的保护性抗体,HBsAb是一种保护系抗体,在HBsAg消失后数周后出现,并可持续多年存在。HBsAb是所有乙肝要关抗体中出现最晚的。常与HBcAb同时存在,而很难与H

持续多年存在。HBcAb-IgM仅出现在急性期,具有鉴别诊断意义。

.乙型肝炎病毒DNA聚合酶(DNAP)DNAP位于HBV核心部分,有逆转录酶活性,是HBV复制的直接指标。

[基因诊断]随着分子生物学技主的发展,应用DNA分子杂交和PCR技术可以检测出血清、体液和组织中HBVDNA的存在情况,是直接、准确的病原学诊断证据。使用PCR及定量PCR技术检测HBVDNA,是乙肝诊断的重大进步。

1.HBVDNA检测或定量检测(病毒载量):

(1)灵敏度提高:WANG等对206名HBsAg阴性、ALT阴性的健康供血者用PCR方法检测HBVDNA,检出阳性9例,占4%。这说明HBsAg虽然是HBV的感染的标志,但由于S基因的变异或低水平表达,而常规方法难以检出,会导致漏检。而使用PCR能较好的弥补。

(2)与HBVM结合使用,可以对临床提供更为有效、更有价值的信息:基因学诊断与HBVM并不是矛盾的,各有优势,在乙肝的诊治过程结合使用更具临床价值。如:临床有资料显示,对于HBVDNA阳性、HBeAg阳性的慢性乙肝病人病情较HBVDNA阳性、HbeAb阴性的病人重,自然缓解率也较低。

(3)动态监测病毒的载量是疗效监测的重要指标:乙肝疗效监测以前用的是指标血清学“两对半”检测,但由于血清学指标反应相对滞后、灵敏度较差,并不是理想的疗效监测指标。近年随着定量PCR在临床上的应用,连续监测HBVDNA血清载量已经成为疗效监测的理想指标。临床上一般认为用药后HBVDNA下降到10^5拷贝/ml以下为对药物完全应答;定量下降大于2个数量级为对药物部分应答;未达上述标准为无应答。

常见的两对半结果

HBsAg

HBsAb

HBeAg

HBeAb

HBcAb

病程

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未感染

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感染早期

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感染初期

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急性或慢性乙型肝炎,高传染性

+

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急性、慢性乙型肝炎或HbsAg携带者

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急性乙肝趋向恢复或慢性乙肝,弱传染性

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急性HBV感染“核心窗口期”或既往曾感染过乙肝,有流行病学意义

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乙肝恢复期,弱传染性

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+

急性乙肝康复期,开始产生免疫力

疫苗接种后或HBV感染后康复

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+

急性HBV感染康复期或有既往感染史,目前保持免疫力

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