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第一章:
1.名词解释:
酶工程:将酶、细胞或细胞器等置于特定的生物反应装置中,利用酶所具有的生物催化功能,
借助工程手段将相应的原料转化成有用物质并应用于社会生活的一门科学技术。
转换数:(K)又称分子活性,或摩尔催化活性。表示在单位时间内,酶分子中每个活
cat
-
性中心或每个酶所能转化的底物分子数,单位为min,是酶催化效率的一个指标。
催化周期:是指酶进行一次催化所需的时间,单位为毫秒或微秒,即T=1/K
cat
比活力:特定条件下,单位质量蛋白质或RNA所拥有的没活力单位数:比活力=酶活力(单
位)/mg(蛋白质或RNA)
酶活力:又称酶活性,指酶催化一定化学反应的能力。
酶活国际单位:在特定条件(25℃,具最适底物浓度、最适温度、最适PH和离子强度系
统)下,每分钟内能转化1μmol产物形成所需要的酶量为1个酶活力单位。
酶反应动力学:研究酶反应速度规律以及各种因素对酶反应速度影响的科学
1.酶工程概述及其研究的主要内容。
酶工程是由酶学与化学工程技术、基因工程技术、微生物学技术相结合而产生的一门新技术,
是工业上有目的地设计一定的反应器和反应条件,利用酶的催化功能,在常温常压下催化化
学反应,生产人类所需产品或服务于其它目的地一门应用技术。
酶工程研究的主要内容包括酶的发酵工程,酶的分离工程,固定化酶与固定化细胞,化学酶
工程,生物酶工程,酶反应器及传感器,酶的非水相催化,酶抑制剂以及酶的应用。
第二章:
名词解释:
诱导物:诱发诱导酶起始合成的物质,常是酶的底物。
诱导作用:由于一个反应的发生,促进另一个反应进行的现象,如可以引起阻遏蛋白的构象
变化,使之不利于与操纵基因结合。
终产物阻遏:由于终产物的过量积累而导致的生物合成途径中酶合成的阻遏。
分解代谢产物阻遏:E.coli在含有能分解的两种底物的培养基中生长时,首先分解利用其
中的一种底物(葡萄糖),而不分解另一种底物(乳糖),这是因为葡萄糖的分解代谢产物阻
遏了分解利用乳糖的有关酶合成的结果。
葡萄糖效应:葡萄糖对分解利用其它底物的有关酶的合成有阻遏作用。
简答题:
1.提高酶产量的措施。
(1)添加诱导物。诱导物分为3类:酶的作用底物,酶的反应产物以及酶的底物类似物。
(2)降低阻遏物浓度。微生物酶的生产受到代谢末端产物的阻遏和分解代谢物阻遏的调节。
为避免分解代谢物的阻遏作用,可采用难于利用的碳源,或采用分次添加碳源的方法培养液
中的碳源保持在不至于引起分解代谢物阻遏的浓度。对于受到末端产物阻遏的酶,可通过控
制末端产物的浓度使阻遏解除。
(3)添加表面活性剂。非离子型的表面活性剂常被用作产物酶促进剂。
(4)添加产酶促进剂。非微生物生长所必需,能提高酶产量但作用机制尚未明确的物质。
2.结合4中酶生物合成的模式,谈谈怎么提高酶产量。
(1)同步合成型:酶的生物合成与细胞的生长同步。当细胞进入对数生长期,酶大量产生;
细胞生长进入稳定期后,酶的生物合成随着停止。
从基因水平改造mRNA的稳定性;降低产酶期的发酵温度。
(2)延续合成型:酶的合成伴随着细胞的生长而开始,但在细胞生长进入稳定期后,酶还
可以延续合成较长的一段时间。
发酵生产中最理想的合成模式。
(3)中期合成型:酶的合成在细胞生长一段时间以后才开始,而在细胞进入稳定期后,酶
的合成也随之停止。
从基因水平和发酵温度着手,改造酶所对应的mRNA的稳定性;改造基因的启动子;降低阻
遏浓度。
(4)滞后合成型:只有当细胞生长进入稳定期以后,酶才开始合成并大量积累。
基因水平改造和发酵过程控制两个方案解除阻遏,将产酶模式改变为延续合成型。
第三章:
名词解释(符号):
ATPE:双水相萃取;利用样品中各组分在这两种互不相溶的双水相液层中分配系数的不同实
现分离目标组分的一种技术。
IEC:离子交换层析,利用吸附在离子交换剂上的可解离基团(活性基团)与流动相中各种
离子化物质发生不同程度的可逆性的离子交换反应,使不同离子型化合物得到分离的一种技
术。
HPLC:高效液相色谱,又称高压液相色谱,是在经典液相色谱法的基础上发展而成的分离分
析技术,是一种更优化的液相色谱技术。
2—DE:双向电泳,又称二维电泳,是将等点聚焦和聚丙烯酰胺凝胶电泳技术联合使用
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