人教版高中生物选择性必修第3册 基因工程（2）.pptVIP

基因工程（2）——PCR技术及其应用

高二年级生物学

PolymeraseChainReaction，PCR

聚合酶链式反应KrayMullis，1944-2019因发明PCR技术，于1993年获得诺贝尔化学奖。

PCR诞生的理论基础：DNA的半保留复制。细胞内复制过程：解旋-子链延伸-复旋

PCR的条件在进行PCR的操作时，科研人员需要向试管中加入：目的基因分子，引物，dNTP，缓冲液，热稳定DNA聚合酶，并在高温条件下进行操作。由细胞内DNA复制的过程推测，这些材料分别充当了DNA复制过程中的哪些条件？

PCR的条件1.DNA复制需要解旋，细胞中这一过程如何实现？在试管中如何实现？细胞中，DNA的解旋由DNA解旋酶催化完成。在试管中，可以通过加热断开氢键完成解旋。所需温度一般为90-95℃。

PCR的条件2.催化DNA子链合成的酶是哪一种酶？PCR反应过程需要较高的温度，所使用的酶需要具有什么样的特点？催化DNA合成的是DNA聚合酶。该酶由中国科学家钱嘉韵于黄石公园热泉微生物中分离得到，70℃条件下反应2h活性残余90%。PCR过程中，需要热稳定DNA聚合酶（Taq酶）催化完成。

PCR的条件3.DNA聚合酶的特点：在已有核苷酸链的3’端添加单个核苷酸。据此推测，PCR还需要提供什么样的条件？根据目的基因两条链端的碱基序列，设计并添加相应引物。两种引物序列