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人白介素6(IL-6)酶联免疫吸附测定试剂盒
使用说明书
产品编号：1910231
本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!
预期应用
ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中IL-6含量。
实验原理
用纯化的IL-6抗体包被微孔板，制成固相载体，往微孔中依次加入标本或标准品、生物
素化的IL-6抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物(TMB)显色。TMB在过氧化物酶
的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的IL-6呈正
相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（值），计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制
1、酶标板：一块（96孔）
2、标准品（冻干品）：2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至
1ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为10,000pg/ml，
将其稀释为500pg/ml后，再做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分
别配制成500pg/ml，250pg/ml，125pg/ml，62.5pg/ml，31.2pg/ml，15.6pg/ml，7.8pg/ml，
样品稀释液直接作为空白孔0pg/ml。如配制500pg/ml标准品：取0.5ml（不要少于
0.5ml）500pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即
可，其余浓度以此类推。
3、样品稀释液：1×25ml。
4、人白介素6:1×25ml。
5、HRP,100X：1×150/瓶（1:100）。临用前以HRP1:100稀释（如：10HRP/990
HRP稀释液），充分混匀，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（100/
1
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孔），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
6、HRP稀释剂：1×12ml。
7、浓洗涤液：1×50ml/瓶。使用时每瓶用蒸馏水稀释10倍。
8、底物溶液：1×12ml/瓶，
9、终止液：1×12ml/瓶（2mol/LHSO）。
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10、覆膜：4张
11、使用说明书：1份
自备物品
1、酶标仪（建议仪器使用前提前预热）
2、微量加液器及吸头，EP管
3、蒸馏水或去离子水，滤纸
标本的采集及保存
1、血清：全血标本请于室温放置2小时或4过夜后于1000g离心20分钟，取
上清即可检测，或将上清置于-20或-80保存，但应避免反复冻融。
2、血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于1000g离心15
分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20或-80保存，但应避免反复冻融。
3、细胞培养物上清或其它生物标本：请1000g离心20分钟，取上清即可检测，
或将上清置于-20或-80保存，但应避免反复冻融。
注：以上标本均应密封保存，4保存应小于1周，-20不应超过1个月，-80不应
超过2个月；标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。
操作步骤
2
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