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高效液相色谱分析简介
化学化工学院
分析化学教研室
2024/8/4
色谱分离过程
色谱分离过程
进
样
器
检测器
2024/8/4
一、高效液相色谱仪
HPLC
高效液相色谱分析法二、高效液相色谱法的特点
featureofHPLC
三、流程及主要部件
highperformanceliquid
generalprocessandmain
chromatograph
assemblyofHPLC
—HPLC
2024/8/4
一、液相色谱仪器
highperformanceliquidchromatograph
2024/8/4
一、液相色谱仪器
highperformanceliquidchromatograph
2024/8/4
二、高效液相色谱法的特点
featureofHPLC
特点：高压、高效、高速
高沸点、热不稳定有机及生化试样的高效分离分析方法。
2024/8/4
三、流程及主要部件
processandmainassemblyofHPLC
1.流程
2024/8/4
2.主要部件
(1)高压输液泵
5
©主要部件之一，压力：150～350×10Pa。
©为了获得高柱效而使用粒度很小的固定相10μm），液
体的流动相高速通过时，将产生很高的压力，因此高压、高
速是高效液相色谱的特点之一。
©应具有压力平稳、脉冲小、流量稳定可调、耐腐蚀等特性
（动画）
2024/8/4
(3)进样装置
流路中为高压力工作状态，
通常使用耐高压的六通阀进样装置，
其结构如图所示：
2024/8/4
(4)高效分离柱
柱体为直型不锈钢管，内径1～6mm，柱长5～40cm。
发展趋势是减小填料粒度和柱径以提高柱效。
2024/8/4
(5)液相色谱检测器
a.紫外检测器
应用最广，对大部分有机化合物有响应。
特点：
灵敏度高；
线形范围高；
流通池可做的很小（1mm×10mm，容积8μL）；
对流动相的流速和温度变化不敏感；
波长可选，易于操作；
可用于梯度洗脱。
2024/8/4
液相色谱流动相
mobilephasesofLC
1.流动相特性
（1）液相色谱的流动相又称为：淋洗液，洗脱剂。流动
相组成改变，极性改变，可显著改变组分分离状况；
（2）亲水性固定液常采用疏水性流动相，即流动相的极
性小于固定相的极性，称为正相液液色谱法，极性柱也称正
相柱。
（3）若流动相的极性大于固定液的极性，则称为反相液
液色谱，非极性柱也称为反相柱。组分在两种类型分离柱上
的出峰顺序相反。
2024/8/4
2.流动相类别
按流动相组成分：单组分和多组分；
按极性分：极性、弱极性、非极性；
按
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