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探析总大肠菌群的检测方法及其优缺点

大肠菌群是引起人类肠道传染病的主要病原体，它普遍存在

于人类的生活用水中，如果人类生活用水的安全质量不能得到保

证，饮用了总大肠菌群超标的水，轻则会使细菌在肠道内慢慢积

累引起肠道疾病，使得人们拉肚子，重则可能会威胁到人们的生

命安全，导致病菌中毒死亡等。基于此，以下就总大肠菌群的检

测方法及其优缺点进行探讨分析，以供参考。

1总大肠菌群的概述

饮用水中的总大肠菌群主要是指大肠杆菌、大肠菌群和粪大

肠菌群三大类型细菌共同组成的大肠菌群。总大肠菌群是指在

37℃条件下培养时，能够使乳糖进行发酵，并且在全天24小时

之内都产酸、产气的革兰氏阴性无芽孢杆菌。主要包括埃希氏菌

属、柠檬酸细菌属肠杆菌属及克雷伯氏菌属四种细菌。总大肠菌

群既包括存在于人及动物粪便的大肠菌群，也包括存在于其他环

境中的大肠菌群。在日常的检测过程中，特别是在饮用水的检测

中，总大肠菌群的检测对检测环境、检测人员的操作水平和经验

要求都很高，且检测时间长达三天。由于其数量大，在体外存活

时间与肠道致病菌相近，且检验方法比较简便，故被作为检验肠

道致病菌的指示菌。水中大肠菌群数的多少，表明水体被粪便污

染的程度，并间接地表明有肠道致病菌存在的可能性。因此，总

大肠菌群是评价饮用水水质的重要指标，具有广泛的卫生学意义。

2总大肠菌群的检测方法

检测总大肠菌群的方法主要有两种，分别是多管发酵法和滤

膜法。

2.1总大肠菌群多管发酵法

多管发酵法是做早被用作水质检测的技术，至今应用已超过

80年，在水样大肠菌群的检测中一直在应用。其核心是将水样进

行10倍系列稀释，分别接种到乳糖蛋白胨培养液中，在35℃培

养48小时，观察细菌生长情况。将产酸产气的发酵管分别转种

在伊红美篮琼脂平板上进行分离培养，并通过革兰染色、镜检和

进行证实试验。结果通过检索最可能数检索表、报告每100ml水

样中总大肠菌群可能数值。这种方法影响因素比较多，例如，非

大肠菌群细菌的干扰，同时不能实行准确的定量，花费时间比较

多，越需要96h以上，由于最后是通过检索MPN检索表得出的

是一种推论的结果，这就决定了该法有时还会低估水样中大肠菌

群的数目甚至造成漏检。但这种方法不需昂贵设备，经过基本微

生物学培训的技术人员可操作，特别适用于不能够使用总大肠菌

群滤膜法的时候。

2.2总大肠菌群滤膜法

总大肠菌群滤膜法在许多国家已经被作为监测饮用水微生

物指标的标准方法，是指用孔径为0.45μm的微孔滤膜过滤水样，

将滤膜贴在添加乳糖的选择性培养基上37℃培养24小时，能形

成特征性的需氧和兼性厌氧的革兰阴性无芽孢杆菌以检测水中

总大肠菌群的方法。最后计算滤膜上生长的总大肠菌群数，以每

100ml水样中总大肠菌群数报告结果。研究人员优化了很多用于

总大肠菌群滤膜法的培养基和培养条件，最具影响力的是北美的

m-Endo型培养基和欧洲的Tergitol-TTC培养基，大肠菌群在m-

Endo型培养基上形成带有金属光泽的红色菌落，在Tergitol-TTC

型培养基上形成橙黄色菌落。夺冠发酵法比总大肠菌滤膜法最明

显的优点是非常便于检测较大体积的水样，这样就能有比较高的

敏感性和可靠性。另外，相比多管发酵法只能半定量而言，总大

肠菌群滤膜法可以定量计数。在饮用水处理过程中有很多化学的

和物理的因素能够引起大肠菌群的非致死性损伤，总大肠菌群滤

膜法最突出的问题是这种应激和损伤的大肠菌群无法在选择性

培养基上形成菌落。此外，总大肠菌群滤膜法的特异性不高，结

果容易受水样中其他细菌的影响而出现误判，也需要结合进一步

的确证试验才能最终确定结果。

3总大肠菌群检测方法的检测结果及其优缺点分析

3.1检测结果分析

（1）出厂水结果分析样品：采集某地3个出厂水及5个管

网水，每个采样点各2份。通过以上两种检测方法中，其得到

的检测结果是基本一致的，都能成功检测出水中总大肠菌群的数

量和数目，而且在实际实验中，每个采样点中所显示的水样结果

都具有着良好的重现性。然而通过对实验中所采用的样品检测结

果进行具体分析，发现多管发酵法得出的检测结果和总大肠菌群

滤膜法检测出的结果有所不同。造成这种现象出现的原因可能是

由于多管发酵法本身的精确度所造成，因为多管发酵法中测量到

的总大肠菌群的数量是通过概率公式进行计算得来的，这样的测

量计算方