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实验四十五植物细胞质膜透性的测定
一、目的
植物细胞质膜是细胞与外界环境的一道分界面,对维持细胞的微环境和正常的代谢起着
重要作用。但植物常受到外界不良因子的影响,而不同植物种类其抗逆性则不同。用电导仪
率法测定植物质膜透性的变化,可作为植物抗逆性的生理指标之一。本实验主要测定低温对
细胞质膜透性的影响,并掌握用电导仪法测定植物细胞质膜透性的原理及方法。
二、原理
植物细胞的细胞质由一层质膜包围着,这种质膜具有选择透性的独特功能。植物细胞与
外界环境之间发生的一切物质交换都必须通过质膜进行。各种不良环境因素对细胞的影响往
往首先作用于这层由类脂和蛋白质所构成的生物膜。如极端的温度、干旱、盐渍,重金属离
2+
子(如Cd等)和大气污染物(如SO、HF、O)等都会使质膜受到不同程度的损伤,其表
23
现往往为细胞膜透性增大,细胞内部分电解质外渗,外液电导率增大。该变化可用电导仪测
定出来。细胞膜透性变得愈大,表示受害愈重,抗性愈弱,反之则抗性愈强。
三、材料、仪器设备
1.材料:植物叶片。
2.仪器设备:电导仪;电子天平;冰箱;真空泵;真空干燥器;恒温培养箱;电炉;5
0ml
烧杯;50ml量筒;小镊子;纱布;表皿;滤纸条;镜头纸;剪刀;玻棒;胶头滴管;瓷盘。
四、实验步骤
1.清洗用具
所用玻璃用具均需先用洗衣粉清洗,然后用自来水、蒸馏水洗3次,干燥后备用。
2.实验材料的准备及处理
选取叶龄相似的植物叶片,剪下后用湿布包住。实验时用自来水将供试叶片冲洗,除去
表面沾污物,再用蒸馏水冲洗1~2次,用干净纱布轻轻吸干叶片表面水分,然后剪成约1c
2
m的小叶片(或用直径为1的打孔器钻取小园片),注意除掉大叶脉。将剪下的小叶片混合
均匀,快速称取鲜样三份,每份1g,分别放入编号为A、B、C的三个烧杯中。作如下处理:
A杯放入冰箱0℃以下作低温处理,处理15~30min后取出(供试叶片也可以在实验前
低温处理好待用,处理温度及时间依不同植物叶片耐寒性而定),加入蒸馏水50ml。
B杯常温处理,加入蒸馏水50ml。
将A、B二杯放入真空干燥器,用真空泵抽气20—30min(以抽出细胞间隙中的空气),
然后缓缓放入空气,从真空干燥器中取出A、B杯。
C杯加入蒸馏水50ml,称重,盖上表皿,置于电炉上煮沸10~15min(煮沸时间依不同
植物叶片而定),冷却后再称重并加蒸馏水至原重量,继续浸泡叶片。
将A、B、C三杯放置室温下浸提1h左右(经常摇动,以有利电解质外渗)。然后将叶
片从杯中夹出进行下一步测定。
3.电导率测定
用电导仪分别测定A、B、C三杯的电导率,同时测定蒸馏水(空白)的电导率(注意:
每测定完一个样液后,用蒸馏水漂洗电极,再用滤纸将电极擦干,然后进行下一个样液的测
定),所测得的结果记入下表:
电导率测定记录表
处理电导率(μS·cm-1)电解质的相对外渗率(%)
蒸馏水(空白)
A(低温)
B(常温)
C(煮沸)
五、结果计算
按下公式计算低温及常温处理电解质的相对外渗率:
处理电导率-空白电导率
电解质的相对外渗率(%)=——————————————×100
煮沸电导率-空白电导率
实验四十二植物体内丙二醛含量的测定
一、目的
通过实验,掌握植物体内丙二醛含量测定的原理及方法。
二、原理
丙二醛(MDA)是由于植物官衰老或在逆境条件下受伤害,其组织或器官膜脂质发生过
氧化反应而产生的。它的含量与植物衰老及逆境伤害有密切关系。测定植物体内丙二醛含量,
通常利用硫代巴比妥酸(TBA)在酸性条件下加热与组织中的丙二醛产生显色反应,生成红棕
色的三甲川(3、5、5-三甲基恶唑2、4-二酮),三甲川最大的吸收波长在532nm
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