甘草有效成分提取.pdfVIP

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甘草有效成分(甘草酸,甘草次酸,甘草苷)的提取

一、甘草酸的提取:

试剂:甘草粗粉,浓HSO,95%乙醇,80%乙醇,浓氨水,冰醋酸。

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取甘草粗粉40g,加水煮沸2次(15倍,1.25h;12倍,1h),脱脂棉过滤,合

并滤液,浓缩,冷却,搅拌下加入浓硫酸至不再析出甘草酸粘性沉淀为止(约

PH=1)。放置,倾出上清液,棕色粘性沉淀用水洗涤数次,60℃以下干燥,粉碎,

即得甘草酸粗品,称重。

将甘草酸粗品称重后加3.5—4倍量95%乙醇浸泡0.5—1h,抽滤,滤渣加

3倍量80%乙醇回流1—2h,滤液冷却后加浓氨水(边加边搅拌)调至弱碱性

(PH=8),减压回收乙醇至糖浆状,趁热加入等体积冰醋酸浸泡洗涤,放冷,析

出结晶,过滤,即得甘草酸单铵盐粗品。称重后,用70—80%乙醇重结晶,即

得甘草酸单铵盐纯品,称重,得率。

二、甘草次酸的提取:

试剂:5%HSO,氯仿,乙醇。

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取甘草酸单铵盐,加5%HSO,加热10h,抽滤,水洗至中性,干燥,即得白

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色甘草次酸粗品,加热氯仿溶解,趁热过滤,所得滤液放冷,通过ALO柱,用

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氯仿洗脱,得甘草次酸粗品,加乙醇重结晶,得甘草次酸结晶。

三、甘草苷的提取:

试剂:70%乙醇,甲醇。

取干燥药材粗粉约lOg,精密称定,加10倍量70%乙醇,回流提取2次,

每次3h回流提取,纱布过滤,将提取液倒入已恒重的蒸发皿中,水浴浓缩至干,

再减压干燥至恒重,得浸膏。

精密称取甘草浸膏量的l/20置于25mL量瓶中,加甲醇适量,超声处理

30min,冷至室温,加甲醇稀释至刻度,摇匀,用045um的微孔滤膜过滤,即制

得供试品溶液。

四、药典同时提取甘草酸和甘草苷:

试剂:70%乙醇,

取本品粉末(过三号筛)0.2g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入70%

乙醇100ml,密塞,称定重量,超声处理(功率250W,频率40kHz)30分钟,取

出,放冷,再称定重量,用70%乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,

即得。

五、含量测定:照高效液相色谱法(附录ⅥD)测定。

1.色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以乙腈为

流动相A,以0.05%磷酸为流动相B,按下表进行梯度洗脱;柱

温35℃;检测波长为237nm。理论板数按甘草苷峰计算应均不

低于5000。

时间(分钟)流动相A(%)流动相B(%)

0~81981

8~3519→5081→50

35~3650→10050→0

36~40100→190→81

2.对照品溶液的制备:取甘草苷对照品、甘草酸铵对照品适量,精密称定,加

70%乙醇制成每1ml各含0.02mg、0.2mg的溶液,即得。

3.测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul,注入液相色谱仪,

测定,即得。

本品按干燥品计算,含甘草苷(CHO)不得少于0.50%;甘草酸(CHO)

21229426216

以甘草酸铵计不得少于2.0%。

技术文章

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