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彩色马蹄莲组培快繁技术规程
1范围
本文件规定了彩色马蹄莲品种组织培养快速繁殖、组培苗的移栽管理和病虫害防治的技术要求。
本文件适用于江苏省采用组织培养的方式进行彩色马蹄莲的繁殖。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,
仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本
文件。
LY/T1589花卉术语
CJ/T135园林绿化球根花卉种球
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
一年生仔球oneyear~oldtuber
组培苗经过一个生长季的栽培发育形成的块茎。
4组培苗的生产
4.1外植体获取
选取直径大于4.0cm的健康的彩色马蹄莲块茎,用800~1000倍广谱性杀菌剂水溶液浸泡15min后,
浅埋于经高压灭菌的湿润细沙中,在光照强度3000lx、光照时间12h/d、(25±1)℃的条件下预培养7~10d
后,选取芽长约1cm的块茎,作为外植体。
4.2外植体的消毒
用软毛刷将块茎刷洗干净,避免损伤顶芽,将其切成长宽均约为1.5cm的带芽小块,放入含1%液
体洗涤剂的溶液中振荡洗涤20min~30min,之后流水冲洗40min~60min,转入超净工作台,75%酒精消
毒30s~45s后,无菌水冲洗2~3次,再用有效氯含量2%~3%的次氯酸钠溶液消毒25min~35min,无菌
水冲洗4~5次,无菌吸水纸吸干表面的水分。
4.3不定芽的诱导
将消毒好的彩色马蹄莲种球切成大小约lcm3的带芽小块,接种至下列培养基中:基本培养基MS,
蔗糖30g/L,6~BA2.0~5.0mg/L,pH5.8;在温度(25±1)℃,黑暗培养,直至外植体萌发出不定芽。
4.4不定芽的增殖
1
将生长至4~6cm的不定芽连同部分块茎一起切下,在不定芽增殖培养基中进行增殖培养:基本培养
基MS,琼脂6.5g/L~7.0g/L,蔗糖30g/L,6~BA2.0mg/L~4.0mg/L,pH5.8;温度(25±1℃),光照强度
为1000~3000lx,光照时间12h,直至诱导出块状丛生芽。
4.5壮芽培养
将块状丛生芽分切成约1.0cm2小块,接种到壮芽培养基上,进行壮芽培养:基本培养基MS,琼脂
6.5g/L~7.0g/L,蔗糖30g/L,NAA0~0.5mg/L,6~BA2.0mg/L~3.0mg/L,pH5.8;温度(25±1)℃,光
照强度为1000~3000lx,光照时间12h,培养周期60d~80d,直至丛生芽长成可以分切成单株的小苗。其
中,在30d~40d,采用同样的配方进行继代培养。
4.6壮苗培养
将壮芽后分切成单株的小苗接种到一下培养基中进行壮苗培养,培养基组分为:基本培养基MS,
琼脂6.5g/L~7.0g/L,蔗糖30g/L,NAA0~1.0mg/L,6~BA2.0mg/L~3.0mg/L,pH5.8;温度(25±1)℃,
光照强度为1000~3000lx,光照时间12h,培养周期60d~80d,直至长成块茎直径约0.5cm小苗。
4.7瓶内结球培养
将块茎约0.5cm小苗保留1cm~2cm叶柄,进行瓶内结球培养:基本培养基MS,琼脂6.5g/L~7.0g/L,
蔗糖40g/L~60g/L,NAA0.5mg/L~1.0mg/L,6~BA1.0mg/L~2.0mg/L,pH5.8;温度(25±1)℃,光
照强度为1000~3000lx,光照时间12h,进行光照培养30d~40d,直至每株小苗均膨大出直径0.5cm~0.8cm
的块茎。
4.8生根培养
将已结球的试管苗,保留1~2cm叶柄,进行生根培养:基本培养基MS,琼脂6.5g/L~7.0g/L,蔗糖
30g/L,IBA1.0mg/L~2.0mg/L,pH5.8;培养温度(25±1)℃,光照强度为1000~3000lx,光照时间为
12h,直至每株苗均长出长度2.0cm~3.0cm、数量3~5条组培苗。
5炼苗和移栽
5.1环境条件
宜在春季或9~10
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