总胆红素检测标准操作规程.pdfVIP

总胆红素

1.目的

规范总胆红素（T-BIL)测定的操作程序，确保总胆红素测定结果准确。

2.检验方法

化学氧化法(终点法）

3.检验原理

总胆红素在表面活性剂TritonX-100存在下，被亚硝酸钠氧化，生成胆绿素，测定

450nm吸光度的减小与总胆红素的浓度成正比。

亚硝酸钠

胆红素=胆绿素

TritonX-100

4.临床意义

血清总胆红素增高见于病毒性肝炎、中毒性肝炎或肝癌、肝内或肝外胆道阻塞、溶

血性疾病、新生儿生理性黄疸等。

测定血清总胆红素与直接胆红素用来鉴别黄疸类型有较大意义。溶血性黄疸总胆红

素增加，直接胆红素正常或稍有增高。肝细胞性黄疸总胆红素和直接胆红素均增高。

阻塞性黄疸总胆红素与直接胆红素均增高，但以后者增高为主。

5.标本采集及干扰因素

5.1标本要求

空腹不抗凝静脉血2~3ml。

5.2标本保存

室温保存，及时送检。室温下胆红素不稳定，故应在收集样品后2h内完成检测，密

封和避光条件下，保存在2-8℃冷藏12h内必须分析，-20℃冰冻3-4个月内必须分

析。

5.3注意事项

使用新鲜血清和血浆，明显溶血对血清TBIL测定有负干扰，脂浊时有正干扰，建议

早晨空腹抽血。

6.检测仪器

日立7180全自动生化分析仪，使用具体要求和校准程序详见《仪器操作规程》。

7.试剂

7.1试剂品牌

编制人：审核人：批准人：

38

美康生物

7.2包装规格

R1:2×60mL+R2:1×30mL

7.3主要组成成分

试剂成分终浓度

-3

试剂1三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液50×10mol/l

曲拉通X-10010ml/l

-3

试剂2磷酸盐缓冲液10×10mol/l

-3

亚硝酸钠80×10mol/l

不同批次的试剂不推荐混合使用

7.4储存条件有效期

试剂在2-8℃保存可稳定1年，试剂开瓶后于2-8℃可稳定1个月。

7.5参数设置

主波长450nm

辅助波长546nm

反应方法终点法

反应温度37℃

反应方向向下

试剂1180ul

样本6ul

混匀，37℃孵育3-5min，读取吸光度A

0

试剂245ul

混匀，37℃孵育3-5min，读取吸光度A,ΔA=A