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微生物检验实验室奈瑟菌属标准操作规程
1.概述
奈瑟菌属是一群触酶、氧化酶试验均阳性的革兰阴性球
菌,包括脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、解乳糖奈瑟菌、灰色
奈瑟菌、粘液奈瑟菌等11个种,临床上以脑膜炎奈瑟菌和
淋病奈瑟菌最为重要。
2.标本类型
血液、脑脊液、分泌物、痰、穿刺液、脓液标本。
3.鉴定
3.1形态与染色革兰阴性双球菌,肾形或咖啡豆状,,
常成双排列,凹面相对。
3.2培养特性初次分离时需在5%~10%二氧化碳环
菌名葡萄糖麦芽糖乳糖蔗糖硝酸盐还原DNA酶
境中生长。在血琼脂平板上形成灰色、光滑、湿润、有光泽、
淋病奈瑟菌+-----
脑膜炎奈瑟菌++----
透明或半透明、边缘整齐、不溶血的菌落,直径1~2mm;在
卡他莫拉菌----++
巧克力琼脂平板上,形成圆形、凸起、湿润、有光泽、灰蓝
色的似露滴状菌落。
3.3生化反应:氧化酶、触酶试验阳性;分解葡萄糖和
麦芽糖,不分解蔗糖、甘露醇及乳糖;尿素酶、吲哚及硝酸
盐还原试验均为阴性。
3.4鉴别要点:
3.4.1本菌特征:革兰阴性双球菌,氧化酶和触酶试验阳
性,分解葡萄糖、硝酸盐还原试验阴性。
3.4.2奈瑟菌与相似菌的鉴别;见表5-37。
表5-37奈瑟菌与相似菌鉴别的关键性试验
注:“+”为90%以上菌株阳性,“-”为90%以上菌株阴
性,“V”为11%~89%菌株阳性。
3.4..3淋病奈瑟菌和卡他莫拉菌的鉴别淋病奈瑟菌
分解葡萄糖,硝酸盐还原试验阴性,而卡他莫拉菌则相反。
两者虽可根据标本来源加以区分,但并非绝对,因为通过性
行为,卡他莫拉菌也可引起尿道炎,而淋病奈瑟菌也能引起
咽炎,应引起注意。涂片不典型,作淋病奈瑟菌培养,同时
作普通培养,有细菌生长可排除淋病奈瑟菌。
3.5操作步骤
3.5.1涂片染色观察菌落特征,在血平板上挑取可以
菌落,涂片染色镜检。
3.5.2氧化酶试验参见《触酶试验标准操作规程》
3.5.3鉴定从血平板上挑取纯菌落,用微生物鉴定仪或
传统生化反应进行细菌
鉴定。
4.药敏
参见《药物敏感性试验标准操作规程》及CLSIM100-S20
最新版本文件.
5.质量控制
参见《质量控制程序》
6.检验结果解释与分析
脑膜炎奈瑟菌对青霉素、磺胺类、链霉素和金霉素敏感。
产酶株引起感染应考虑用头孢曲松或头孢噻肟替代。检出B-
内酰胺类酶阳性的淋病奈瑟菌则提示青霉素、氨苄西林、阿
莫西林耐药。
7.临床意义
脑膜炎奈瑟菌存在于携带者和脑膜炎患者的鼻咽部,通
过飞沫经空气传播,冬末春初为流行高峰。感染者为幼儿和
青少年,感染后多数患者呈携带状态或隐性感染。少数出现
上呼吸道感染症状,仅极少数发展成败血症,进而累及脑膜、
脊髓膜,形成化脓性脑脊髓炎。
8.鉴定流程
菌落观察:灰色、湿润、透明或半透明
涂片染色:G-双球菌,肾形或咖啡豆状
氧化酶和触酶试验阳
+麦芽糖-
脑膜炎奈瑟菌淋病奈瑟菌
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