培养基配制、适用性检查标准操作程序.pdfVIP

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题目培养基配制及适用性检查标准操作程序新订□修订□

文件编号编制部门

制定人审核人批准人

制定日期年月日审核日期年月日批准日期年月日

颁发部门生效日期

分发部门

目的：制定培养基配制、培养基适用性检查的标准操作程序。

范围：适用于微生物实验室培养基的配制和适用性检查。

责任者：微生物检验员

所用器具、仪器、材料、菌种

器具、仪器：高压蒸汽灭菌锅、高温灭菌柜、隔水恒温培养箱、生化培养箱、双人净

化操作台、单人净化操作台、干燥箱、恒温水浴锅、电子天平、500ml三角瓶、移液

管、培养皿、试管、接种环、酒精灯

材料：标准干燥培养基（购于生物研究所）、待验证培养基

菌种：大肠杆菌CMCC（B）44102、金黄色葡萄球菌CMCC（B）26003、

枯草芽孢杆菌CMCC（B）63501、白色念球菌CMCC（F）10231

沙门氏菌CMCC（B）50094

1.培养基的配制

1.1准备工作

1.1.1选择适宜容量的容器配制试剂，配制培养基的容器应为玻璃容器，以避免接触

金属离子，如吸管、试管、三角瓶和平皿等，应按《玻璃容器清洗规程》洗涤、干

燥、灭菌。

1.1.2配制用水

培养基配制用水应为纯化水，纯化水应临用新配。

1.2配制

1.2.1记录所用脱水培养基的品名、批号、生产日期、生产厂家及配制处方。

1.2.2用分度值为0.01的电子天平准确按处方量进行称量并装入三角瓶内。

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1.2.3用量筒按照培养基处方配比加入纯化水。

1.2.4用硅胶橡皮塞塞上瓶口，轻轻振摇使充分混匀。

1.2.5培养基在配置后必须进行PH值的测定，以确保符合药典要求和生产厂家的规

定，一般情况下，PH值不能超过规制值±0.2。

1.2.6用牛皮纸包扎瓶口，贴上标签，注明品名、批号、配置日期、配置人、有效期。

1.3灭菌

将上述已配制的培养基放入高压蒸汽灭菌锅按培养基灭菌条件进行灭菌（每次配制的

培养基应在2小时内进行有效灭菌，否则极易染菌。若未能在2小时内进行有效灭菌，

则倒掉重新配制）。若没有具体要求，一般灭菌温度（压力）为121℃（0.1MPa），

灭菌时间为20分钟。

灭菌完成后，待高压灭菌锅温度、压强自然下降为“0”值，方可取出灭菌好的培养

基（不可未降温时拿出，否则培养基内外会形成负压，易染菌）。

1.4培养基的保存

1.4.1贮存条件

待培养基冷却至室温，置洁净的冰箱冷藏室于4℃存放。（不得冻结,否则，融化后常

因理化条件改变而不能再用）。

1.4.2保存时限

基础营养培养基应在2周内用完。

生化鉴别培养基应在1周内用完。

选择性分离鉴别培养基制成平板后应在24小时内用完。

按时间差培养基质量（外观、失水、过期等情况），出现异常应及时处理。质量出现

问题的培养基应采取高温灭活处理方式（121℃20分钟）。

1.5填写培养基配制记录

1.6培养基的使用

1.6.1配制的培养基应在有效期内使用（4℃冰箱冷藏室储存保质期为15天）。

1.6.2固体培养基灭菌后再融化只允许1次，再融化应注意温度及水分的控制，融化

后的培养基应置于45~50℃水浴中保存（时间不超过8小时）。

1.6.3倾注培养基的温度应控制在50℃左右。

1.6.4倾注培养基前，应擦干培养基容器外壁的水，避免水滴进培养基中造成污染。