第十单元　第61课时　基因工程的基本工具和基本操作程序-2025年高中生物大一轮复习.pdf

第61课时基因工程的基本工具和基本操作程序

1.概述基因工程是在微生物学、生物化学和分子生物学等学科基础上发展

课标要求起来的。2.阐明重组DNA技术的三种基本工具。3.阐明基因工程的基本

操作程序。

2023·新课标·T62021·全国乙·T382021·湖

1.基因工程的基本工具

北·T7

考情分析2023·全国乙·T382023·全国甲·T382023·湖

2.基因工程的基本操作

北·T42023·广东·T20

程序

2021·广东·T22

考点一基因工程的基本工具

1．基因工程的概念

2．基因工程的诞生和发展

(1)肺炎链球菌转化实验不仅证明了DNA是遗传物质，还证明了DNA可在同种生物不同个体

之间________。

(2)DNA双螺旋结构的提出和______________的证明。

(3)中心法则的确立。

(4)______________的破译。

(5)基因转移载体的发现。______________________________的发现为DNA的切割、连接以

及功能基因的获得创造了条件。

(6)________体外重组的实现。

(7)重组DNA表达实验的成功。

(8)DNA测序和合成技术的发明。

(9)________技术的发明。

(10)________________技术可以实现对特定基因的定点插入、敲除或替换。

3．重组DNA技术的基本工具

(1)限制性内切核酸酶(简称“限制酶”)

提醒①限制酶的识别序列一般由6个核苷酸组成，少数由4个、8个或其他数量的核苷酸

组成。

②限制酶作用的化学键只能是磷酸二酯键。

③在切割含目的基因的DNA分子时，需用限制酶切割两次此DNA分子，产生4个末端。只

有这样才能使目的基因的两端都有可连接的黏性末端或平末端。

(2)DNA连接酶

(3)载体

(1)基因工程是人工操作导致的染色体变异，变异是不定向的()

(2)DNA连接酶可以连接目的基因与载体的氢键，形成重组DNA()

(3)限制性内切核酸酶、DNA连接酶和质粒是基因工程中常用的三种工具酶()

(4)质粒通常采用抗生素合成基因作为标记基因()

将从苏云金杆菌中获取的Bt基因转入棉花细胞内培育转基因抗虫棉的过程中，需借助多种分

子工具且经历多个操作步骤。实验人员使用限制酶EcoRⅠ和NheⅠ切割质粒。如图表示常用

的限制酶识别序列和切割位点以及质粒上的限制酶切割位点。请思考以下问题：

(1)请用图示法写出限制酶EcoRⅠ和NheⅠ切割后形成黏性末端的过程。

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(2)切割图示中的目的基因应选用哪类限制酶？请说明理由。

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归纳总结限制酶的选择

(1)不破坏目的基因原则：如图甲中可选择PstⅠ，而不选择SmaⅠ。

(2)保留标记基因、启动子、终止子、复制原点原则：质粒作为载体必须具备标记基因，所选

择的限制酶尽量不要破坏这些结