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Caco-2细胞单层膜模型实验概述

口服给药是最重要的给药方式之一，药物在肠道内的吸收速度及程度是影响药物生物利

用度的重要因素。药物的肠道吸收研究可以提供吸收机制、吸收部位及影响吸收的因素等重

要信息，为药物的研发提供参考。

一、口服药常用的研究方法

目前研究药物在肠道吸收的方法主要分为体内法（invivo）、在体法（insitu）、体外

法（invitro）。3种研究方法适用不同的研究对象，应根据不同的研究需要进行选择。

1.体内法

体内法是以整体动物机体为研究对象，进行药动学研究。

口服给药后，在不同时间点采集生物样本如血液、尿液，再通过一定方法测定其药物

武

浓度，计算达峰时间（Tmax）、达峰浓度（Cmax）、药时曲线下面积（AUC）等药动学

参数，进而评价药物吸收的程度和速度。

汉

此法采用整体动物进行实验，能真实地反映药物口服后的体内吸收情况，但是它综合

了物化、生理、剂型等众多因素的结果，不能特异性地反映肠道对药物的吸收作用。

合

又由于实验周期长、操作相对繁琐、影响因素较多、动物个体差异较大等原因，故体

内法很少应用于药物吸收机制的研究，一般用于研究药物体内药动学特征。

2.在体法研

常用的在体法包括在体肠灌流法、肠襻法、肠道血管插管法等。

生

在体法是建立在整体动物水平上的实验，与体内法不同的是其将干扰因素大大减少，

同时保证了肠道神经与内分泌调节的完整性，也保证了血液与淋巴液供应，使得待考察组

物

织的生物活性大大提升，能够较为准确地反映药物在肠道的真实吸收情况，常用于研究药

物的渗透和吸收动力学。

在体法由于是建立在整体水平之上，因此个体差异较大，对实验动物的数量有一定要

求，以保证最小的数据变异。

3.体外法

常用的体外法主要有外翻肠囊法、组织流动室法、刷状缘膜囊泡法、细胞培养模型法

等。

这些实验方法是基于分离部分肠黏膜或肠段，或是采用人肠细胞模拟肠环境评价药物

吸收情况。

总的来说体外法优点在于操作简单、试验周期短，可以用于药物早期高通量筛选。

但肠道的不同节段以及缺乏血液、淋巴液的供应对细胞旁路通道和酶活性造成的影响

均会影响实验结果，其组织活性与其在体内环境中会存在较大的差异，不能反映药物在肠

道环境中的真实吸收情况。

方法优点缺点

体内法能够真实反映药物的总体吸难以从细胞和分子水平研究

收情况药物的吸收机制

在体法能够较为准确地反映药物在个体差异大，需要动物数量

肠道的真实吸收情况大

体外法操作简单、周期短不能反映药物在肠道环境中

的真实吸收情况

二、Caco-2细胞模型实验

武

细胞模型是体外法评价药物吸收的重要手段，最常用的是Caco-2细胞模型。

1.模型介绍汉

Caco-2细胞模型最早是由美国堪萨斯大学药学院RonaldT.Borchardt博士的实验室以及

合

英国的Ciba-Geigy实验室在二十世纪八十年代后期建立的。是第一个被国外制药企业以及

实验室广泛应用的肠道吸收的细胞模型。也是迄今为止的最好的肠道转运模型和上皮转运模

型。研

Caco-2细胞系来源于人的直肠癌