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川芎嗪对胃癌细胞及血管内皮细胞增殖影响

1川芎嗪对胃癌细胞及血管内皮细胞增殖影响川芎嗪对胃癌细胞及血管内皮细胞增殖影响【摘要】目的研究川芎嗪对SSSSSSSS胃腺癌细胞及人脐静脉血管内皮细胞(HUVES)增殖的影响。

方法将不同浓度川芎嗪分别加入体外培养的胃癌细胞，在无因子培养基和在条件培养基中培养的HUVES中，用MTT法检测细胞增殖情况。

结果川芎嗪浓度为25～625g/mL时，对SSSSSSSS胃腺癌细胞和无因子基培养的HUVES增殖均无影响(P＞S.S5)；川芎嗪浓度为S25g/mL作用48、S2h、浓度为625g/mL作用24、48、S2h对条件培养基诱导的HUVES增殖有明显影响(P＜S.S5)，增殖抑制率随着药物浓度的增加和作用时间的延长而升高。

结论川芎嗪对胃腺癌细胞和血管内皮细胞无直接杀伤作用，但对条件培养基诱导的HUVES增殖具有抑制作用。

【关键词】胃腺癌；血管内皮细胞；川芎嗪；生长抑制剂胃癌是一种常见的对人类危害较大的疾病，我国在2S世纪SS年代进行的全国恶性肿瘤死亡率调查表明，胃癌死亡率高居恶性肿瘤死亡率的首位［S］，目前使用手术、化疗、放疗等治疗方法存在许多局限，而且不能有效防治胃癌的转2移和复发。

川芎嗪(tetramethylpyrazine，TMP)是从活血化瘀中药川芎中分离得到的一种生物碱，主要应用于缺血性心、脑血管疾病，毒副作用少。

有研究发现［2］，川芎嗪对MKN45人胃癌低分化腺癌细胞有直接的杀伤作用；张薇等［3］的研究则显示川芎嗪能抑制胃癌前病变大鼠新生血管生成，可能对胃癌具有一定的预防和治疗作用。

本文拟通过MTT比色法观察川芎嗪对胃癌细胞和血管内皮细胞增殖的影响，初步探讨川芎嗪在胃癌治疗中的作用和意义。

S材料与方法S.S材料RMPIS64S培养基(美国Sibco)，SFM培养基(美国Sibco)，胎牛血清(FBS，杭州四季青)，谷氨酰胺(美国Amresco，博理分装)，重组人内皮细胞生长因子(rhSESSF(美国Ramp;D)，F8兔抗人多克隆抗体、FITSS羊抗兔IgS(武汉博士德)，盐酸川芎嗪注射液(常州制药厂有限公司，规格：

4Smg/2mL，批号：

S4S323S)，MTT(美国Amersco，博理分装)。

S.2方法S.2.S胃癌细胞培养SSSSSSSS胃腺癌细胞(购自中国科学院上海细胞库)，用RMPIS64S完全培养基(加入SS%胎牛血清、2mM谷氨酰胺)培养。

S.2.2HUVES培养采用胰蛋白酶消化法分离获取［4S5］。

用内皮细胞培养基(含SS%胎牛血清、2mM谷氨酰3胺和Sng/mLrhSESSF的SFM培养基)培养，传代后用第八因子相关抗原免疫荧光染色法进行鉴定。

HUVES第3～6代用于实验。

S.2.3川芎嗪对细胞增殖影响的检测S.2.3.S对胃腺癌细胞增殖的影响SSSSSSSS胃腺癌细胞以SSS4个/mL的密度接种于S6孔板内，每孔接种SSSL，用RMPIS64S完全培养基(含SS%胎牛血清、2mM谷氨酰胺)培养。

培养24h后，吸弃孔中培养基。

每块培养板分4组，每组6个复孔。

正常对照组加入SSSL/孔RMPIS64S完全培养基；川芎嗪组则将含川芎嗪25g/mL，S25g/mL，625g/mL的RMPISS64S培养基依次加入相应的孔中，每孔SSSL。

药物作用第24、48、S2h取出一块培养板，MTT法检测细胞增殖情况(检测4SSnm处光吸收值)。

S.2.3.2对无因子培养HUVES细胞增殖的影响HUVES以2SS4个/mL的密度接种于S6孔板内，每孔接种SSSL，用SFM完全培养基(含SS%胎牛血清和2mM谷氨酰胺)培养。

培养24h后，吸弃孔中培养基。

每块培养板分4组，每组6个复孔。

正常对照组则加入SSSL/孔SFM完全培养基；川芎嗪组则将含25g/mL，S25g/mL，625g/mL的SFM完全培养基依次加入相应孔中，每孔SSSL。

分别在药物作用第24、48、S2h取出一块培养板，MTT法检测细胞增殖情况(检测4SSnm处光