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沉默TRPV1基因对利多卡因所致细胞凋亡的影响及其机制

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416523713076南昌大学专业学位研究生学位论文沉默TRPV1基因对利多卡因所致细胞凋亡的影响及其机制EffectofTRPV1genesilenceoncellapoptosisinducedbylidocaineanditsmechanism琚幼婷培养单位（院、系）：

南昌大学指导教师姓名、职称：

胡衍辉主任医师专业学位种类：

临床医学硕士论文答辩日期：

2013.5.30答辩委员会主席：

评阅人：

年月日学位论文独创性声明一、学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。

据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南昌大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。

与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。

学位论文作者签名（手写）：

签字日期：

年月日二、学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解南昌大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。

本人授权南昌大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编本学位论文。

同时授权北京股份有限公司和中国学术期刊（光盘版）电子杂志社将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》和《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》中全文发表，并通过网络向社会公众提供信息服务，同意按章程规定享受相关权益。

学位论文作者签名（手写）：

导师签名（手写）：

签字日期：

论文题目年月日签字日期：

年月日姓名学号论文级别博士□硕士□院/系/所E_mail专业备注：

□公开□保密（向校学位办申请获批准为保密，年月后公开）摘要摘要目的：

构建针对人TRPV1基因的pSUPERretro-puroTRPV1逆转录病毒表达载体，感染U87-MG细胞，观测其沉默TRPV1基因的效果。

通过沉默TRPV1基因观测利多卡因处理后对U87-MG的细胞状态和凋亡情况的影响，以探讨利多卡因是否通过TRPV1产生神经毒性损伤。

方法：

利用Ambion在线设计软件设计针对人TRPV1基因的shRNA干扰序列，克隆到pSUPERretro-puro载体上。

对重组质粒进行DNA序列测定和酶切分析。

用磷酸钙法制备pSUPERretro-puroTRPV1逆转录病毒，将其感染到U87-MG细胞，经嘌呤酶素筛选阳性克隆后采用荧光定量PCR及Westernblotting法检测TRPV1表达。

U87-MG的细胞分为空白对照组、基因沉默组以及空载体组。

对于...