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过氧化物酶染色法--第1页
安徽省立医院检验科质量管理文件质量手册检验方法
项目名称:碱性磷酸酶染色法
检验标本:外周血涂片
收费标准:50元
检验方法:细胞化学染色
原理:在PH9.5时,底物被白细胞的酶水解,释出磷
酸根和芳香萘胺,后者与偶氮盐偶合,形成有
色沉淀。
试剂:1.固定液(保存于4℃)冰箱
2.0.05缓冲液(PH9.4~9.6)保存于4℃冰箱
3.底物
4.二甲基甲酰胺
5.固紫B
操作步骤:1.血片或髓片放置4C固定液中30秒,流水冲
洗,空气晾干
2.工作液:(1)用二甲基甲酰胺溶解底物后,
倒入缓冲液中
(2)再加入固紫B混匀
3.把固定后的玻璃片放入工作液中,置37C水
温箱45分钟
4.流水冲洗
5.苏木精复染
6.流水洗,晾干
7.直接油镜观片
结果:酶活动处呈亮红颗粒
正常参考值:积分10~100分/100个中性分叶核细胞
意义:NAP活性增高见于细菌性感染、类白反应、再
障、某些肿瘤、急性淋巴细胞白血病、慢性粒细胞白血病急性变等。
NAP活性减低见于慢性粒细胞白血病、急性粒细胞白血病、绿色瘤、红白血
病、PNH、病毒感染等。
注意事项:1.外周血涂片标本需新鲜,收到标本后需立即
用专用固定液固定。
2.试剂需防在4℃冰箱内,临用前拿出,试剂打开后需立即应用,最长不得
超过30min。
过氧化物酶染色法--第1页
过氧化物酶染色法--第2页
安徽省立医院检验科质量管理文件质量手册检验方法
项目名称:过氧化物酶染色法
检验标本:骨髓涂片
收费标准:50元
检验方法:细胞化学染色
检验原理:过氧化物酶在细胞内的颗粒从HO中释放出
22
氧,氧化联苯胺,引起在过氧化酶活性处,沉
积棕黑色的化合物。
试剂:1.0.3%联苯胺酒精溶液
2.HO溶液(3%HO+蒸馏水5ml)
2222
操作步骤:1.骨髓涂片加0.3%联苯胺酒精溶液10-15滴
2.一分钟后,加HO溶液10-15滴
22
3.五分钟后,流水冲洗
4.再用瑞氏染液复染
5.水洗,晒干
结果:酶活力处呈棕黑色。
意义:急性白血病中可借过氧化物酶染色区蓓别急淋
与急非淋。急淋POX呈阴性反应,FAB分型规定阳性率<3%。急非淋呈阳性
反应,阳性率≥3%。
注意事项:1.骨髓涂片标本需新鲜,收到标本后需立即染
色。
2.HO需新鲜配制,浓度要适中,过浓、过稀都不可。
22
过氧化物酶染色法--第2页
过氧化物酶染色法--第3页
安徽省立医院检验科质量管理文件质量手册检验方法
项目名称:酸性磷酸酶染色法
检验标本:骨髓涂片
收费标准:50元
检验方法:细胞化学染色
原理:同硷性磷酸酶,区别在于底物不同。最重要的
是反应时PH值不同,因而捕获剂(偶氮盐)液不同
试剂:1.固定液(保存于4℃冰箱)
2.0.1M醋酸缓冲液
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