《微生物的分离和培养》复习课件.pptVIP

1．培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板，你用什么办法来估计培养基的温度？提示：可以用手触摸，感觉上以刚不烫手为准。2．在用平板划线法接种大肠杆菌时，第一次划线前、每次划线前及划线操作结束后，都要灼烧接种环，请分析其目的分别是什么。提示：第一次灼烧每次划线前灼烧划线结束灼烧目的避免接种环上可能存在的微生物污染培养物杀死上次划线结束后接种环上残留的微生物，使每次划线的微生物来自上次划线末端杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者1．微生物培养中有关实验操作的注意事项(1)倒平板操作：①培养基灭菌后，需冷却至50℃左右时才能倒平板，原因是琼脂在44℃以下凝固。②培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙。③整个操作过程要在酒精灯火焰旁进行。④平板冷凝后要倒置的原因：防止皿盖上的冷凝水珠落入培养基，造成污染。⑤若倒平板时，培养基溅在皿盖和皿底之间的部位，这个平板应丢弃。(2)平板划线操作：①第一次划线及每次划线之前都需灼烧接种环灭菌，划线操作结束仍需灼烧接种环。②灼烧接种环之后，要等其冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。③划线时最后一区域不要与第一区域相连。④划线用力要大小适当，防止用力过大将培养基划破。2．稀释涂布平板操作(1)稀释操作时：每支试管及其中9mL水、移液管需灭菌；操作时试管口和移液管应在离火焰1～2cm处。(2)涂布平板时：稀释涂布平板的操作比较复杂，且各个细节均需保证“无菌”，应特别注意：①酒精灯与培养皿的距离要合适。②吸管头不要接触任何其他物体。③吸管要在酒精灯火焰周围使用。例二：有关平板划线操作正确的是()A．使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌B．打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞C．将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划3～5条平行线即可D．最后将平板倒置，放入培养箱中培养解析：无菌操作显得很困难，但在酒精灯火焰附近约10cm的四周为无菌区，因而菌种试管和待接种试管管口不能离开火焰附近，接种环、棉塞也不能离开火焰附近。接种完毕之后为了防止菌体污染，要在火焰上灼烧管口和接种环。为防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染，应将平板倒置。答案：D退出***知识点一培养基及无菌技术知识点二大肠杆菌的纯化培养自主预习，自我领悟难重聚焦，质疑解惑知识点一培养基及无菌技术自主预习，自我领悟难重聚焦，质疑解惑知识点二大肠杆菌的纯化培养自主预习，自我领悟难重聚焦，质疑解惑新知探究随堂测试课堂小结第一节：微生物的分离和培养3．固体培养基的配制过程为：计算―→称量―→溶化―→灭菌―→倒平板。4．平板划线法和稀释涂布平板法是微生物接种的常用方法。1．培养基中含有水、无机盐、氮源和生长因子等营养物质。2．实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、热灭菌和高压蒸汽灭菌等。1．培养基(1)概念：人们按照微生物对的不同需求，配制出的供其的营养物质。营养物质生长繁殖液体培养基固体培养基菌落（2）种类（加入琼脂等凝固剂）：微生物在上面可形成。(3)营养成分：水、无机盐、、，此外还要满足微生物生长对、特殊营养物质及的要求。2．无菌技术(1)目的：防止污染。(2)方法——消毒和灭菌。碳源氮源pH氧气外来杂菌消毒灭菌概念使用较为的物理或化学方法杀死物体或的部分微生物(不包括)使用理化因素杀死物体内外微生物(包括和)常用方法消毒法、消毒法、消毒法、紫外线消毒法灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌适用对象操作空间、液体、双手等接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等温和表面内部芽孢和孢子煮沸巴氏化学药剂强烈所有芽孢孢子1．下面是察氏培养基(培养霉菌所用)的主要成分，请根据下述培养基，回答下列问题：蔗糖NaNO3K2HPO4KClMgSO4·7H2OFeSO4琼脂水定容至1000mL20g3g1g1g0.5g0.01g20g(1)该培养基根据物理性质划分应是什么培养基？为什么？(2)该培养基包含微生物生长和繁殖所需要的几类营养物质？分别是