鸭MyoG、MRF4基因的克隆及其在骨骼肌组织中的发育表达研究.pdfVIP

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2024-09-06 发布于江苏
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鸭MyoG、MRF4基因的克隆及其在骨骼肌组织中的发育表达研究.pdf

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鸭MyoG、MRF4基因的克隆及其在骨骼肌组织中的

发育表达研究

Introduction

Skeletalmuscledevelopmentisacomplexprocessthatrequires

thecoordinatedexpressionofvariousgenes.TheMyogenicRegulatory

Factors(MRFs)aretranscriptionfactorsthatregulatemuscle

developmentanddifferentiation.TwoimportantmembersoftheMRF

familyareMyogenin(MyoG)andMRF4(alsoknownasMyf6).MyoG

andMRF4playcriticalrolesindeterminingmusclefibertypeand

regulatingmusclecellfusion.Inthisstudy,weaimedtoclonetheMyoG

andMRF4genesfromduck,andinvestigatetheirdevelopmental

expressioninskeletalmuscletissue.

MaterialsandMethods

TotalRNAwasextractedfromvarioustissuesoftheWhitePeking

duckusingtheTRIzolreagent.Reversetranscriptionpolymerasechain

reaction(RT-PCR)wasperformedtoamplifythecodingsequenceof

MyoGandMRF4usingspecificprimersdesignedbasedontheknown

sequencesofthesegenesinotherspecies.ThePCRproductsweregel-

purifiedandclonedintothepMD-18Tvectorforsequencing.

Forgeneexpressionanalysis,totalRNAwasextractedfromthe

skeletalmuscletissueofducksatvariousstagesofdevelopment

(embryonicday11,15,and19,andpostnatalday1,15,30,and60)

usingtheTRIzolreagent.RT-PCRwasusedtodetecttheexpressionof

MyoGandMRF4,withGAPDHservingastheinternalcontrol.ThePCR

productswereseparatedbyagarosegelelectrophoresis,andsemi-

quantitativeanalysiswasperformedusingImageJsoftware.

Results

ThecodingsequencesofduckMyoGandMRF4weresuccessfully

cloned,andwerefoundtobehighlysimilartothecorrespondinggenes

inotherspecies.TheexpressionprofilesofMyoGandMRF4during

skeletalmuscledevelopmentwerealsoexamined.Theresultsshowed

thattheexpressionlevelofMyoGwashighestatembryonicday15,and

thengraduallydecreasedduringpostnataldevelopment.Incontrast,

MRF4

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