《新会陈皮陈化年份鉴定方法 高效液相色谱-高分辨质谱法（征求意见稿）》.docx

2

T/GAIAxxx—xxxx

新会陈皮陈化年份鉴定方法高效液相色谱-高分辨质谱法

1范围

本文件规定了新会陈皮陈化年份鉴定的液相色谱-高分辨质谱方法。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

《中华人民共和国药典》（2020年版）

GB/Z35959-2018液相色谱-质谱联用分析方法通则DB4407/T70地理标志产品新会陈皮

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1陈皮Citrireticulataepericarpium

本品为芸香科植物橘CitrusreticulataBlanco及其栽培变种的干燥成熟果皮。釆摘成熟果实，剥取果皮，晒干或低温干燥。

3.2新会陈皮Xinhuicitrireticulataepericarpium

新会陈皮为地理标志产品保护范围内栽培的茶枝柑（Citrusreticulata‘Chachi’）的果皮经晒干或烘干，并在保护区域范围内贮存陈化三年以上称为新会陈皮。按采收加工时间可分为：柑青皮（青皮）、微红皮（二红皮）和大红皮（红皮）。新会陈皮的地理标志产品保护范围为广东省江门市新会区会城街道办、大泽镇、司前镇、罗坑镇、双水镇、崖门镇、沙堆镇、古井镇、三江镇、睦洲镇、大鳌镇和江门市滨海新区管委会（原围垦指挥部）现辖行政区域。

3.3陈皮陈化年份Agingyearofcitrireticulataepericarpium指以年份表示的陈皮陈化度，说明产品达到相应等级的陈化水平。

3.4陈皮生产年份Productiveyearofcitrireticulataepericarpium指采收果实并加工成果皮的年份，说明产品什么年份生产。

4方法提要

随着陈皮陈化年份的增加，其中的化学成分发生规律性变化，分子式为C20H22O7的6个同分异构体中，前三个化合物含量随年份的增加而降低，后三个化合物含量随年份的增加而升高，其比值与陈化年

3

T/GAIAxxx—xxxx

份具有显著的线性关系，利用该6个特征性成分的转化因子（S），建立了陈皮陈化年份计算模型。样品经有机溶剂提取后，高效液相色谱分离，电喷雾质谱正离子模式电离，高分辨质谱全扫描方式测定，数学模型计算得到陈皮陈化年份，结合检测时的具体年份，计算陈皮生产年份。

5试剂和材料

除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为二次蒸馏水。

5.1甲醇：色谱纯。

5.2乙腈：色谱纯。

5.3甲酸：色谱纯。

5.4不同年份陈皮对照药材由广东省科学院测试分析研究所（中国广州分析测试中心）提供。

6仪器设备

6.1高效液相色谱-高分辨质谱。

6.2超声波发生器。

6.3分析天平：感量0.1mg。

7测定步骤

7.1样品前处理

陈皮经粉碎过筛后，准确称取0.5g于锥形瓶中，加入70%（v/v）甲醇20mL，称重，超声提取30min，70%甲醇补重，滤膜过滤，装瓶。

7.2仪器参考条件

7.2.1液相色谱条件

7.2.1.1色谱柱：AgilentRRHDC18（150×2.1mm，1.8μm）色谱柱或性能相当的色谱柱；

7.2.1.2流动相：A相：0.1%甲酸水溶液，B相：乙腈，梯度洗脱（表1）。

表1梯度洗脱程序

时间（min）

流动相A（%）

流动相B（%）

0.0

90

10

1.0

90

10

10.0

20

80

15.0

5

95

17.0

5

95

17.1

90

10

20.0

90

10

4

T/GAIAxxx—xxxx

7.2.1.3流速：0.3mL/min；

7.2.1.4柱温：35℃;

7.2.1.5进样量：1.0μL。

7.2.2质谱参数

质谱工作条件如下：

a）离子源：电喷雾离子源（ESI）；

b）扫描模式：正离子模式；

c）扫描方式：全扫描；

d）喷雾电压：3500V；

e）鞘气（N2）温度：350℃;

f）鞘气（N2）流量：11L/min；g）干燥气（N2）温度：300℃;h）干燥气流速：8L/min；

i）离子传输管温度：325℃;

j）质谱扫描范围：m/z100~1000。

7.3液相色谱-高分辨质谱测定

将7.1得到的样品溶液按照7.2进行分析，得到陈皮样品的总离子流色谱图，从总离子流图中提取m/z375.1438