胡萝卜肉质根细胞的悬浮培养和不定芽的诱导(实验报告).pdf

胡萝卜肉质根细胞的悬浮培养和不定芽的诱导(实验报告)--第1页

本科学生综合性实验报告

学号114120***姓名@%

学院生命科学学院专业、班级11应用生物教育#班

实验课程名称植物组织培养实验

教师及职称龙维彪（讲师）

开课学期2013至2014学年下学期

填报时间2014年6月10日

云南师范大学教务处编印

胡萝卜肉质根细胞的悬浮培养和不定芽的诱导(实验报告)--第1页

胡萝卜肉质根细胞的悬浮培养和不定芽的诱导(实验报告)--第2页

一．实验设计方案

实验序号三实验名称胡萝卜肉质根细胞的悬浮培养和不定

芽的诱导

实验时间2014.5.12——2014.6.6实验室睿智楼3幢325

实验内容：

3-1胡萝卜愈伤组织的增殖培养

3-2胡萝卜细胞悬浮培养基和不定芽分化培养基的配制

3-3胡萝卜细胞悬浮培养和不定芽分化

1．实验目的：

1)、通过本次实验，为细胞的悬浮培养提供充足的色泽新鲜、生长速度快、质地疏

松的愈伤组织；

2）、学会设计适合胡萝卜细胞悬浮培养和不定芽分化的培养基，为胡萝卜细胞悬浮

培养和不定芽分化提供适合培养基；

3）、掌握细胞悬浮培养的基本操作技术、不定芽分化的原理以及不定芽诱导的方法。

2．实验原理、实验流程或装置示意图

实验原理

1）、将继代一次的胡萝卜愈伤组织选择生长状态良好、色泽新鲜未褐化的部分转接

[1]

到愈伤组织增殖培养基上培养，即可实现愈伤组织的增殖。

2）、一般情况下，适合于愈伤组织增殖的培养基也适合于细胞的悬浮培养，只是要

把琼脂去掉。

3）、影响茎芽分化因素主要是培养基中生长素和细胞分裂素的浓度和比例。当生长

素的相对浓度较高时，有利于细胞的增殖和根的分化，若细胞分裂素的相对浓度较

[2]

高，则促进芽的分化，当这两种激素之间的比例适中时，则仍产生无结构的愈伤

组织。

4）、将实验3-1建立的生长状态良好、色泽新鲜、结构松散的胡萝卜肉质根愈伤组

[3]

织转接到胡萝卜细胞悬浮培养基中，于25℃、全黑暗、摇床上震荡培养，即可

分离得到单细胞，进一步可建立胡萝卜细胞悬浮培养系。

5）、将实验3-1建立的生长状态良好、色泽新鲜、结构紧密的胡萝卜肉质根愈伤组

织转接到胡萝卜不定芽分化培养基上，置于温度25℃、光照时间14h/d、光照强

度1000~2000Lx条件下即可分化再分化成苗（或丛芽）。

胡萝卜肉质根细胞的悬浮培养和不定芽的诱导(实验报告)--第2页

胡萝卜肉质根细胞的悬浮培养和不定芽的诱导(实验报告)--第3页

实验流程

MS培养基母液的配制与保存

胡萝卜肉质根愈伤组织诱导、