原创力文档- 1、本文档共5页，可阅读全部内容。
- 2、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
?
?
HPLC法同时测定复方盐酸二甲双胍片中格列美脲和盐酸二甲双胍的含量
?
?
【摘要】目的：建立复方盐酸二甲双胍片中格列美脲和盐酸二甲双胍的HPLC含量检测方法。方法：流动相为0.025%十二烷基磺酸钠溶液（33%）和磷酸二氢钠的0.03mol/L甲醇溶液（67%）组成，用磷酸将流动相pH值调至3.5，色谱柱为VP-ODS（250mm×4.6mm），柱温控制在30℃，检测波长为215nm，流速控制在1.2ml/min。结果：进行HPLC检测系统适应性试验，试验内容包括精密度试验、重现性试验、稳定性试验和回收率试验，确立了色谱条件和建立了标准曲线，盐酸二甲双胍和格列美脲在标准曲线范围内线性关系良好。结论：复方盐酸二甲双胍片中二甲双胍和格列美脲的HPLC检测法简便、可靠，能满足日常含量检测要求。
【关键词】HPLC；盐酸二甲双胍；格列美脲
复方盐酸二甲双胍片中两种有效成分的含量比较大，传统HPLC检测方法繁琐，而且该含量检测方法的重现性较低，为此本文通过改变HPLC的色谱条件，建立了更为高效和可靠的HPLC检测方法，现将应用效果汇报如下。
1仪器和试药
1.1仪器
日本岛津LC-20A高效液相色谱仪，色谱工作站为LCsolution，检测器为SPD型紫外分光光度计，色谱柱为日本岛津的VP-ODS（250mm×4.6mm）色谱柱，酸度计为上海雷磁PHS-2型台式酸度计。
1.2试药
本文所用试剂磷酸二氢钠、甲醇、磷酸和乙腈均为色谱纯级，上述试药都采购自上海化学试剂厂。复方盐酸二甲双胍片（北京京丰制药有限公司，批，盐酸二甲双胍及格列美脲对照品购自中国药品与生物制品检定所。
2实验方法
2.1色谱条件
流动相为0.025%十二烷基磺酸钠溶液（33%）和磷酸二氢钠的0.03mol/L甲醇溶液（67%）组成，用磷酸将流动相pH值调至3.5，色谱柱为VP-ODS（250mm×4.6mm），柱温控制在30℃，检测波长为215nm，流速控制在1.2ml/min，进样量为20μl。按照盐酸二甲双胍计算理论塔板数，塔板数≥3000，检测样本与杂质之间分离度符合要求。
2.2对照品溶液制备
分别精密称取格列美脲和盐酸二甲双胍对照品12.5mg和12.52mg，将格列美脲和盐酸二甲双胍对照品分别置于200ml和100ml容量瓶中，放置格列美脲对照品的容量瓶中加入甲醇溶液至刻度摇匀，精密量取格列美脲甲醇溶液1ml加入放置有盐酸二甲双胍对照品的容量瓶中，加入流动相至刻度摇匀[1]。
2.3标准曲线绘制
将32.15mg盐酸二甲双胍对照品和1.562mg格列美脲对照品置于50ml容量瓶中，加入流动相至刻度摇匀。精密量取上述对照品混合溶液1、3、6、9、12、15ml置于10ml容量瓶中，加入流动相至刻度摇匀，精密量取上述不同含量的混合对照品溶液20μl，依据2.2中的色谱条件，记录每种含量的色谱图，色谱图以峰面积为纵坐标（Y），对照品含量为横坐标（X）[2]。根据检测结果建立标准曲线方程（y=3.97×103X-4.29×102；n=6；r=0.9993），标准曲线方程表明盐酸二甲双胍在0.643-9.645mg之间，峰面积与浓度线性关系良好，格列美脲在0.0312-0.4686mg之间，峰面积与浓度线性关系良好。
2.4供试品溶液制备
取测定样品复方盐酸二甲双胍片去除包衣后研细，精密称量相等于含0.125g盐酸二甲双胍的微细粉末，置于100ml容量瓶中，加入流动相至刻度，摇匀后超声。精密量取上述溶液10ml至100ml容量瓶中，加入流动相至刻度摇匀。
2.5精密度实验
精密量取2.2中配置的对照品溶液，含量相当于0.3215mg/L盐酸二甲双胍和0.7810mg/L格列美脲，按照上述色谱条件连续进样3次，记录每次进样的峰面积和保留时间，根据记录结果计算RSD值。
2.6重现性实验
根据2.4中配置本文所要检测的供试品溶液，按照上述色谱条件连续进样3次，记录每次进样的峰面积和保留时间，根据记录结果计算RSD值。
2.7稳定性试验
按照2.4中配置本文所要检测的供试品溶液，分别于1、3、6、12、18、24h进样检测，记录每次进样的峰面积和保留时间，根据记录结果计算RSD值。
2.8回收率实验
按照2.4中配置本文所要检测的供试品溶液，在配置的供试品溶液中加入浓度分别为0.05、0.10、0.15μg/ml的对照品标准溶液，按照上述色谱条件连续进样3次，记录每次进样的峰面积和保留时间，根据记录结果计算回收率。
3结果
3.1精密度和重现性试验结果
根据2.5的精密度试验方法，格列美脲和盐酸二甲双胍的RSD计算结果均为0.5%，精密度试验结果说明检测仪器性能良好。根据2.6的重现性试验方法，格列美脲和盐酸二甲双胍的含量分别为101
文档评论（0）