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总蛋白测定(双缩脲法)SOP--第1页
q总蛋白测定（双缩脲法）SOP
1.原理：所有蛋白质分子都含有肽键。在碱性溶液中，肽键与铜离子结合，生成蓝紫色的
化合物。蓝紫色化合物在546nm(540nm-560nm)处的吸光度与肽键的数量成正比关系，
依次可以计算蛋白质的含量。
2.方法：双缩脲法
3.试剂：总蛋白试剂其含量为氢氧化钠0.6mol/L
酒石酸钾钠32mol/L
碘化钾20mol/L
硫酸铜12mol/L
4.储存条件及有效期：（1）原包装试剂在2℃-8℃避光贮存，有效期36个月。
（2）试剂开盖后在2℃-8℃避光保存，稳定期30天。
5.样本要求：（1）样本种类：新鲜无溶血血清。
（2）样本采集：取空腹静脉血3.0ml，置于带分离胶试管中，标本采集
后，3000r/min离心5min，分离血清，立即密封送检。
（3）样本干扰：对反应吸光度有干扰的样本，包括溶血和浑浊的样本都
可能影响检测结果，遇上述情况建议重新采集。
（4）样本保存：密封无蒸发条件下样本2℃-8℃可稳定3天。
6.检验步骤：（1）开生化仪见生化仪的SOP。
（2）操作步骤：参数设置；试剂装载；校准；质控；样本装载；测定；
结果审查；报告。
a.参数设置
总蛋白测定参数
通道号1
加样体积3.0ul
R1体积150ul
主波长540nm次波长660nm
方法END
初始测量点0末始测量点27
b.试剂装载每天在生化仪上进行试剂检查，检测的样本数，如
发现量不多或不能满足当天需要，则需要加试剂，注意同一批号，
不同批号的不能混用。
c.校准换一批新试剂或质控做的不理想需要校准。
d.质控在做样本之前每天做质控，质控符合要求才可以做样
本，不符合要求需要做校准，做完校准后，用校准品当样本来测，
做质控。
e.样本装载样本符合要求，放在试管架上，编号，上机检测。
f.测定
g.结果审查
h.报告
7.参考值55-85g/L
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