植物组织培养(1).pptVIP

4.Muir、Steward和Reinert1953年，Muir利用往复式摇床的振荡，在液体培养基中进行了万寿菊和烟草愈伤组织的培养，获得了单细胞或密集细胞的悬浮液，并可继代增殖。这既是培养方法上的突破，也是Haberlandt培养单细胞设想的实现。1958年，英国学者Steward和Reinert几乎同时在胡萝卜根组织的韧皮部单细胞悬浮培养液中诱导出胚状体，并长成完整植株。证实了Haberlandt的细胞全能性理论。建立和发展阶段（上世纪60年代至今）从植物细胞全能性理论的提出到其被实验科学地证实，植物组织培养研究领域走过了近60年的发展历程。当影响植物细胞分裂和器官形成的机理被揭示后，学者们对该领域进行了全面研究，获得的成果枝繁叶茂，发表的文章浩如烟海，形成了一套成熟的植物组织培养的理论体系和技术方法，拥有着极其广泛的应用领域，从而在生物科学中建成了这门具有理论、技术和应用的科学。1.Thimann和Wickson1958年，他们发现腋芽（当顶芽存在时为休眠状态）的生长，可以通过外源细胞分裂素的应用而启动。这样，将茎段培养在含有细胞分裂素的培养基上，就可以在一个具有完整顶芽的生长中的茎上诱导侧芽的形成。这将消除顶端优势，得到大量不定芽。Thimann2.Morel－脱毒、快繁商业化1952年，Morel和Martin提出了植物脱毒（virusfree）技术，通过分离已被病毒感染的大丽花个体的根尖，并将其离体培养，重新获得了无病毒的大丽花。1960年，Morel利用兰花茎尖培养，实现了脱毒和快速繁殖（rapidclonepropagation）的两个目的。这一技术导致欧洲、美洲和东南亚许多国家“兰花工业”的兴起。Morel3.MurashingeMurashinge发展了一套标准的离体繁殖方法，将这一技术广泛普及。与Skoog一起筛选出至今仍被广泛应用的MS培养基。4.Guha和Maheshwari等——花药培养1964-1966年，印度学者Guha和Maheshwari成功地由曼陀罗花药培养获得单倍体植株，开创了花粉培育单倍体的新途径。1973年，Nitsch采用花药预培养方法获得了烟草花粉植株的纯合二倍体。1974年，Sunderland建立了散落花粉系列培养法。1982年，Ghandimathi和Imamura直接分离花粉进行培养成功，建立了一个适于深入研究雄核发育的实验体系。MaheshwariNitschNitsch发展了培养烟草和曼陀罗小孢子的技术、单倍体染色体加倍的技术，并且在5个月之内收集到二倍体纯合子的种子（Nitsch,1974,1977）。5.Cocking等-原生质体培养1960年，英国学者Cocking首次用酶解方法获得了原生质体，开创了植物原生质体培养的研究。1971年，日本学者Nagata和Takebe首次将烟草叶肉原生质体培养出再生植株。1985年，Fujimura获得首例禾谷类——水稻的原生质体培养的再生植株。1986年，Spangenberg获得了甘蓝型油菜的原生质体培养的再生植株。Cocking6.Carlson等——原生质体融合1972年，Carlson利用硝酸钠进行了烟草种间原生质体的融合实验，获得了首株体细胞种间杂种植株。1974年，Kao利用聚乙二醇（PEG）进行了大豆和烟草科间原生质体的融合，获得了3％的异质体。同年，Bonne和Eriksson利用PEG成功进行了具有叶绿体的海藻和不具有叶绿体的胡萝卜根原生质体的融合。1978年，Melchers获得了首个属间杂种植株（马铃薯番茄）。1981年，Zimmerman提出了原生质体融合的新方法——电融合。Melchers植物遗传操作成功的前景引起了大众的兴趣。Melchers和他的同事（1978年）通过将马铃薯和番茄原生质体融合，允许遗传信息在两个不同的有机体中移动，获得了一个杂种植物。这一方法提供了获得亲缘相近但生殖隔离的种间杂种的机会。7.Kaul等——次生代谢物生产1969年，Kaul发现三角叶薯蓣悬浮培养物可以生产薯蓣皂苷配基。1973年，Furuya和Ishii发现人参培养细胞可以产生人参皂苷。Nickell组织培养的先驱，尤其是在培养中次生代谢物质的生产方面。Street－培养设施化Street和他的助手开创了各种细胞悬浮培养的程序（恒化器和恒浊器）。0.3植物组织培养的应用及展望快繁和脱毒育种次生代谢物生产种质保存在遗传、生理、生化、病理等研究上的应用1.离体快繁（试管苗和人工种子）和脱毒1）试管苗在生产上应用最广泛、经济效益较大。特点：繁殖系