ELISA检测技术课件.ppt

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ELISA檢測技術

;ELISA技術;ELISA技術的三個基本原理;ELISA的分類、原理和操作; 優點:

1、待測抗原只需一個免疫結合位點,適合小分子抗原如激素和藥物之類;

2、操作步驟簡單快捷,只需一個保溫洗滌過程。

缺點:

1、酶標記抗體的用量大;

2、定量檢測的靈敏度和重複性存在不足。;雙抗夾心法; 優點:

1、待測抗原需要兩個或兩個以上的免疫結合位點,所以適合大分子抗原的檢測,一般在分子量5000D以上;

2、由於增加了一層抗體,提高了特異性檢測的靈敏度,尤其是改良的雙抗加心法;

3、重複性提高。

缺點:

1、操作複雜,費時費力。;抑制性測定;間接法測抗原

此方法操作簡單、迅捷但重複性一般較差;通常用於抗體效價的測定和某些疾病的早期診斷。;ELISA的操作要點;樣本提取與保存;試劑的準備;ELISA的固相載體;包被的方式;加樣;封閉;洗滌;洗滌方式(浸泡式);保溫;顯色和比色;標準曲線建立

樣品10μl+990μlPBS;ELISA測定數據的處理;Thankyou!

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