《基因工程的原理和技术》精品课件.pptVIP

*************************……GAATTC…………CTTAAG……EcoRⅠ……GAATTC…………CTTAAG…………GAATTC…………CTTAAG……不同来源的DNA片段混合再用DNA连接酶即可将不同种来源的DNA片段连接起来某DNA片段目的基因……GAATTC…………CTTAAG……酶切……GAATTC…………CTTAAG…………GAATTC…………CTTAAG…………GAATTC…………CTTAAG…………GAATTC…………CTTAAG……同一种三、基因工程的三种基本工具：1、限制性核酸内切酶－－分子手术刀2、DNA连接酶－－分子缝合针3、载体（运载体）－－分子运输车三、基因工程的三种基本工具：2、DNA连接酶－－分子缝合针1）定义：能催化两个DNA片段末端之间－P磷酸基团和－OH基团形成磷酸二酯键，使两末端连接的酶。大肠杆菌DNA连接酶T4DNA连接酶来源大肠杆菌T4噬菌体功能催化形成磷酸二酯键DNA黏性末端的连接黏性末端、平末端均可连接2）、种类3）、作用及特点连接酶无活性5’-POH-3’连接酶T4DNA连接酶网上查询：DNA连接酶有连接单链DNA的本领吗？三、基因工程的三种基本工具：1、限制性核酸内切酶－－分子手术刀2、DNA连接酶－－分子缝合针3、载体（运载体）－－分子运输车三、基因工程的三种基本工具：3、载体（运载体）－－分子运输车1）定义：基因工程中，携带目的基因进入受体细胞进行扩增和表达的工具称为载体。网上查询：自然条件下外源DNA片段可以进入受体细胞吗?1）使用适当的载体可以提高转化率；2）单独的目的基因会被受体细胞识别降解；3）载体具有能在受体细胞内稳定存在，并自主复制的能力，能保证目的基因在受体细胞内的复制。4）载体上有报告基因，可以报告转化是否成功等。自然条件下原核生物的基因重组有转化（如肺炎双球菌的转化）、转导和接合等方式。基因工程为什么要有载体?三、基因工程的三种基本工具：3、载体（运载体）－－分子运输车1）、定义：基因工程中，携带目的基因进入受体细胞进行扩增和表达的工具称为载体。2）、载体应具备的条件1、载体DNA必需有一个或多个限制酶的切割位点。2、载体DNA必需具备自我复制的能力，或整合到受体染色体DNA上随染色体DNA的复制而同步复制。3、载体DNA必需带有标记基因4、载体DNA必需安全3）、代表种类：质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒天然的DNA分子可以直接用做基因工程载体吗？实际上自然存在的噬菌体、质粒等并不完全具备条件，都要进行人工改造后才能用于基因工程操作。如：大肠杆菌质粒载体pBR322，λ噬菌体衍生物等。重组DNA分子的模拟制作重组DNA分子的模拟制作三、基因工程的三种基本工具：1、限制性核酸内切酶－－分子手术刀（1）来源：微生物（2）种类与命名：4000种（3）特点：只能识别特定的核苷酸序列，并在特定的部位切割。（4）结果：破坏磷酸二酯键，形成黏性(平)末端限制酶的识别序列一般由4-8个核苷酸对（回文序列）组成一、基因工程的概念二、基因工程的理论基础：三、基因工程的三种基本工具：2、DNA连接酶－－分子缝合针1）、定义：能催化两个DNA片段末端之间－P磷酸基团和－OH基团形成磷酸二酯键，使两末端连接的酶。大肠杆菌DNA连接酶T4DNA连接酶来源大肠杆菌T4噬菌体功能催化形成磷酸二酯键DNA黏性末端的连接黏性末端、平末端均可连接2）、种类3）、作用及特点连接酶无活性5’-POH-3’连接酶T4DNA连接酶三、基因工程的三种基本工具：3、载体（运载体）－－分子运输车1）、定义：基因工程中，携带目的基因进入受体细胞进行扩增和表达的工具称为载体。2）、载体应具备的条件1、载体DNA必需有一个或多个限制酶的切割位点。2、载体DNA必需具备自我复制的能力，或整合到受体染色体DNA上随染色体DNA的复制而同步复制。3、载体DNA必需带有标记基因4、载体DNA必需安全3）、代表种类：质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒下节课基因工程的基本操作程序***************所在知识模块：选修3现代生物科技专题-第一章基因工程-第一节《基因工程的原理和技术》学科：生物适用年级：高二学校名称：安徽省阜阳市第一中学制作人：韩冰制作日期：2018