基因工程的基本操作程序【48页】.pptx

基因工程的基本操作程序;基因工程的基本操作程序;基因工程的基本操作程序;一、目的基因的获取;1.基因文库:

将含有某种生物不同基因的许多DNA片断，导入到受体菌的群体中，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库;3.基因文库的构建;;目的基因的mRNA;IMN;①概念：PCR全称为_______________，是一项

在生物____复制_____________的核酸合成技术;利用PCR技术扩增目的基因;2.过程;利用PCR技术扩增目的基因;PCR仪;一次性

吸液枪头;PCR技术扩增过程;二、基因表达载体的构建;（一）构建目的;

1、目的基因;;;复制原点+目的基因+启动子+终止子+标记基因;三、将目的基因导入受体细胞;方法;1、将目的基因导入植物细胞的方法：农杆菌转化法;基因枪法又称微弹轰击法，是利用压缩气体产生的动力，将包裹在金属颗粒表面的表达载体DNA打入受体细胞中，使目的基因与其整合并表达的方法。;植物花粉在柱头上萌发后，花粉管要穿过花柱直通胚囊。花粉管通道法就是在植物受粉后，花粉形成的花粉管还未愈合前，剪去柱头，然后，滴加DNA（含目的基因），使目的基因借助花粉管通道进入受体细胞。;2、将目的基因导入动物细胞

（1）方法：显微注射法

（2）程序;分子水平;1.检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因;知识延伸——DNA分子杂交技术;2.检测目的基因是否转录出了mRNA;3.检测目的基因是否翻译出蛋白质;（二）个体水平;1）以下说法正确的是

A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列

B、质粒是基因工程中唯一的运载体

C、运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接

D、基因控制的性状都能在后代表现出来;2）不属于质粒被选为基因运载体的理由是

A、能复制

B、有多个限制酶切点

C、具有标记基因

D、它是环状DNA;3）有关基因工程的叙述中，错误的是

A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来

B、限制性内切酶用于目的基因的获得

C、目的基因须由运载体导入受体细胞

D、人工合成目的基因不用限制性内切酶;4）有关基因工程的叙述正确的是

A、限制酶只在获得目的基因???才用

B、重组质粒的形成在细胞内完成

C、质粒都可作为运载体

D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料;5）基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是

A、人工合成目的基因

B、目的基因与运载体结合

C、将目的基因导入受体细胞

D、目的基因的检测和表达;上述三种目的基因提取的方法有何优缺点？;2.基因文库的构建方法;;;目的基因的mRNA;PCR技术—聚合酶链式反应

;四种脱氧核苷酸(dNTP);5/