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样品

•样品处理的好坏直接关系到整个LC-MS分析的成

败，必须要有成熟规范的样品方法。

•样品预处理各步不能随意省略,如萃取、分离、去

盐等。某些化合物必须化学衍生化以适应LC-MS

要求，如磷酸酯水解。

•若MS信号实在太低,考虑换另外的样品处理方法。

•浓度非常低的样品不能保存太长时间,容器吸附、

分解等使样品浓度降低，标准品工作液现配现

做.

选择离子化方法

•根据样品性质确定离子化方式:高极性化合物,大分

子,蛋白质、肽类、低聚核苷酸等生物分子；胺

类、季铵盐等；含杂原子化合物如氨基甲酸酯等,

适合ESI(IS)。

•弱极性/中等极性的小分子，如脂肪酸，邻苯二甲

酸等；含杂原子化合物如氨基甲酸酯、脲等，适合

APCI（HN）。ESI不行的：非极性化合物如

苯等;APCI不行的：非挥发性样品;热稳定性差的样

品。

选择离子化方法

•碱性化合物宜用正离子方式，酸性化合物宜

用负离子方式，如未知,可能正负都要做,有

些化合物正负都出峰,选择灵敏度高的方式,

不明确的优先用正离子方式试。

LC条件的选择

•根据化合物类型选择流动相组成，甲醇-水，乙腈-

水或甲醇-乙腈-水，某些化合物只有某种流动相体

系才出峰。一般正离子方式用甲醇，负离子方式用

乙腈好些，通常有机相比例高些好。

•梯度的设定：梯度变化太快对离子化效率影响很

大，相应源参数也应该改变，如恒定比例流动相能

满足分离要求时，尽量不用梯度，尤其定量分析

时。

LC条件的选择

•流动相中加入甲酸、乙酸铵等可提高正离子

化效率，但是否加酸不是，还要根据

LC的分离情况，样品在酸性条件下的稳定性

等决定。通常PH值低些[M+H]+比率高，PH

+++

值高些[M+Na]、[M+K]或[M+NH]比率

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高。

LC条件的选择

++

•定性分析时，有时加一些NH4，Li等,可帮

助确定判断母离子，对碎片较少化合物可增

加质谱特征性，但会使生物大分子的质谱复

杂化。

•水的选择：娃哈哈纯净水比普通蒸馏水强，

若在玻璃瓶中已存放时间太长，有可能变

质，使本底增大，LC增高，换新水。

LC条件的选择

•溶解样品的溶剂：用流动相或甲醇、乙腈溶

比用含水多的溶剂LC峰系形好。如果常用的

流动相不能很好溶解样品，可用少量特殊溶

剂先将样品溶解后再用流动相稀释。

•LC流量在色谱柱和MS允许情况下适当高可

以压缩峰宽，使峰强度提高。

•当只有粗色谱柱，只能大流量时可采用三通

分流，以适应MS的流量要求。

LC条件的选择

•选细色谱柱，如内径2mm，进样量可以

小，提高相对浓度，离子化效率，灵敏度。

•换长些的色谱柱，对定性分离效果好，但分

析时间延长，如峰形仍不理想，可考虑另选