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第六章免疫技术
掌握
（1）免疫分析的基本原理
（2）免疫分析的基本原理
（3）免疫技术中常用的分离方法
熟悉
（1）性核素125I作为标记物的优势
（2）125I标记抗体（抗原）的方法和质量评价指标
（3）免疫的技术优势和临床应用
了解性防护的基本知识
（一）名称解释
免疫分析：以性核素标记抗原为特点，基于标记抗原和非标记抗原对同一抗体有相
同亲合力的竞争性免疫分析；常采用PFG—双抗体对B或F进行分离，测定结合部分
活性，剂量反应曲线为反向函数曲线。
免疫分析：以性核素标记抗体为特点，以过量125I标记抗体与待测抗原进行非竞争
性免疫结合反应，采用固相免疫吸附方式对B或F进行分离，测定结合部分活性，剂
量反应曲线为正向函数曲线。
性标记物：采用氯胺T方法将性核素连接在抗原或抗体分子上所形成的复合物。
比活性：指单位质量标记物中所含的性强度，也可理解为每分子抗原（或抗体）平
均所结合的性原子数目，常用Ci/g或Ci/mmol表示
化学纯度：化学纯度指在标记物中结合在抗原（或抗体）上的活性占该标记物
总活性的百分比。
（二）简答题
1、完整免疫分析试剂盒由哪几部分组成？
1标准品抗原：已知浓度的标准品抗原，用于制作标准曲线。
2标记抗原：性核素125I标记的抗原分子
3抗体：针对待测抗原特异性抗体。
4分离剂：一定浓度PEG溶液。
5缓冲液
6质控：用于检测实验结果的有效性。
2、比较免疫分析和免疫分析。
RIAIRMA
标记物抗原抗体
抗体用量限量过量
反应模式竞争性分析非竞争性分析
反应时间较慢较快
分离技术PEG-双抗体法固相吸附法
测量范围较窄较宽
敏感度较低较高
应用范围小分子半抗原大分子抗原或抗体
3、如何评价性标记物的质量？
性标记物的鉴定包括化学纯度、比活性和免疫活性三个参数。
化学纯度：在标记物中结合在抗原（或抗体）上的活性占该标记物总活性的百
分比。一般情况下，被标记物（抗原或抗体）的纯度、标记后纯化效果可影响此参数，同时
也可用于标记物的稳定性。
比活性：单位质量标记物中所含的性强度，也可理解为每分子抗原（或抗体）平均
所结合的性原子数目，常用Ci/g或Ci/mmol表示。直接影响免疫分析的敏感度。
免疫活性：指与抗原或抗体反应的能力，反映标记过程中被标记物免疫活性受损情况。免疫
活性的高低影响抗原抗体反应能力，影响其工作效价；当然也会影响检测的敏感度。
填空
1免疫技术类型主要包括：RIA和IRMA。
2免疫性核素的量单位有：性活度、性比活度和性浓度。
3性核素选择原则是：高比活度、适宜半衰期、对抗原或抗体没有损害、容易标记。
4性标记物时，常用的标记方法有：直接法和间接法。
5性标记物纯化常用的方法有：葡聚糖凝胶过滤法、薄层层析法、纸层析法、电泳法和
高效液相层析法。
6免疫技术试剂盒主要组成试剂有：性标记物、抗体、B/F分离剂。
7RIA的基本操作可分为：抗原抗体分离、B/F分离、性强度测定、数据处理四
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