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干细胞诱导分化的方法及各类诱导试剂的配置
YAOXiang
由于易分离获得、免疫原性低且具有多向诱导分化潜能,骨髓基质干细胞(Bone
marrowstromastemcells,MSCs)成为了组织工程与再生医学中理想的种子细胞。
正是由于上述原因,骨髓基质干细胞成为了很多研究者关注并使用的模型细胞。
本文将着重于骨髓基质干细胞的成骨诱导分化、成软骨诱导分化和成脂诱导分
化三个方向加以介绍,相关内容有利于实验研究者快速而有效地配制上述各类诱
导分化试剂,进而极大缩短前期探索实验和文献搜索整合所耗费的大量时间。本
文主要内容涵盖:
1.成骨诱导分化中诱导液的添加方案(包含换液周期及诱导试剂浓度)
2.成骨诱导分化中各类诱导试剂的产品信息及母液配置方案
3.成脂诱导分化中诱导液的添加方案(包含换液周期及诱导试剂浓度)
4.成脂诱导分化中各类诱导试剂的产品信息及母液配置方案
5.成骨与成脂共诱导液的添加方案(包含换液周期及诱导试剂浓度)
6.成骨与成脂共诱导试剂的产品信息及母液配置方案
7.成软骨诱导分化中诱导液的添加方案(包含换液周期及诱导试剂浓
度)
8.成软骨诱导分化中各类诱导试剂的产品信息及母液配置方案
注:下述诱导方案经多次实验验证是行之有效的,笔者利用相关方案参与发表的部分参考文献如下:
1.YaoX,PengR,DingJD*.Cell-materialinteractionsrevealedviamaterialtechniquesofsurfacepatterning.
AdvancedMaterials,2013;25:5257-86.(材料领域TOP期刊)
2.YaoX,HuYW,CaoB,PengR,DingJD*.Effectsofsurfacemolecularchiralityonadhesionanddifferentiation
ofstemcells.Biomaterials,2013;34:9001-9.(生物材料领域TOP期刊)
3.YaoX,PengR,DingJD*.Effectsofaspectratiosofstemcellsonlineagecommitmentswithandwithoutinduction
media.Biomaterials,2013;34:930-9.
4.PengR,YaoX,CaoB,TangJ,DingJD*.Theeffectofcultureconditionsontheadipogenicandosteogenic
inductionsofmesenchymalstemcellsonmicropatternedsurfaces.Biomaterials,2012;33:6008-19.(IF:8.39)
5.PengR,YaoX,DingJD*.Effectofcellanisotropyondifferentiationofstemcellsonmicropatternedsurfaces
throughthecontrolledsinglecelladhesion.Biomaterials,2011;32:8048-57.
首先需要说明的是骨髓基质干细胞正常传代培养所需的培养基为“基础培养
液”,一般2-3天更换一次新的培养液。基础培养液是基于低糖的DMEM
(DulbeccosmodifiedEaglemedium,后文均以简写的DMEM替代)所配置,其
中含有100U/ml的青霉素,100μg/ml的链霉素,2mM的L-谷氨酰胺和10%的
胎牛血清(Bovineserumalbumin,FBS)。上述试剂全为Gibco品牌(下述诱导
液中也需用到这些试剂,直接购买使用即可)。
一.成骨诱导分化中诱导液的添加方案(包含换液周期及诱导试剂浓度)
对于单独的成骨诱导,干细胞需在“成骨诱导液中”中连续培养,采用每3
天更换一次新诱导液的方案进行。就总的时间跨度来
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