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免疫荧光技术中不同固定剂对RhoA蛋白定位的影响--第1页
［摘要］目的:观察免疫荧光技术中不同固定剂对SGC7901细胞中RhoA蛋白定位的影
响，找出最适合观察RhoA蛋白细胞内定位的固定方法。方法:采用免疫荧光的方法观察
在使用不同固定剂（2%多聚甲醛，4%甲醛，甲醇，丙酮，10%三氯醋酸）及0.3%TritonX-100
穿孔的条件下，RhoA蛋白在SGC7901细胞中的定位。结果:用2%多聚甲醛固定，不用
0.3%TritonX-100时，染色显示胞质内可见少量RhoA蛋白散在分布，核内则有RhoA蛋白
浓聚;用0.3%TritonX-100后，质内只能见极少量阳性染色，核内蛋白染色变得清晰。甲醛固
定后染色显示RhoA蛋白主要在核内分布，使用TritonX-100后染色更为清楚。甲醇和丙酮
固定后染色显示RhoA蛋白主要在胞质内分布，核内基本未见阳性分布，加TritonX-100后
核内染色增强，胞质染色减弱。另外，使用10%三氯醋酸固定未加TritonX-100时染色较淡，
胞质胞核都可见，加TritonX-100后核内可见蛋白浓聚，胞质染色减少。结论:用免疫荧光
法观察RhoA定位时，固定剂的不同以及是否加TritonX-100对观察RhoA蛋白细胞内定
位具有较大的影响。
［关键词］固定剂;免疫荧光显微镜术;TritonX-100;RhoA
EffectofdifferentfixativesonlocationofRhoAproteinbyimmunofluorescence
microscopy
QINYou，CHENYong-chang
（SchoolofMedicine，JiangsuUniversity，Zhenjiangjiangsu212001，China）
［Abstract］Objective:ToobservetheeffectofdifferentfixativesonthelocationofRhoA
proteinandfindtheoptimumfixativeforthelocalizationofRhoAinSGC7901cellsby
immunofluorescencemicroscopy.Methods:ThesubcellularlocationofRhoAproteinin
culturedSGC7901cellsfixedwithdifferentfixativessuchas2%paraformaldehyde，
4%formaldehyde，methanol，acetone，and10%trichloroaceticacid（TCA）wasstudiedby
immunofluorescencemicroscopy.Results:Cellsfixedby2%paraformaldehydewithout
TritonX-100treatmentshowedaccumulationofRhoAinnucleusbutlittledistributionin
cytoplasm.AfterpenetratingwithTritonX-100，RhoAproteincouldnotbedetectedin
cytoplasmandwasmoreaccumu-latedinnucleus.Cellsfixedby4%formalde
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