TCFIAS 6006-2024 酿酒酵母培养物中甘露聚糖和β-葡聚糖含量的测定 高效液相色谱法.docxVIP

ICS65.120CCSB46

团体标准

T/CFIAS6006—2024

酿酒酵母培养物中甘露聚糖和β-葡聚糖

含量的测定

高效液相色谱法

Determinationofmannanandβ-glucaninsaccharomycescerevisiaeculture—Highperformanceliquidchromatography

2024-02-07发布2024-03-05实施

中国饲料工业协会发布

T/CFIAS6006—2024

I

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由中国饲料工业协会团体标准技术委员会提出并归口。

本文件起草单位：北京英惠尔生物技术有限公司、北京市兽药饲料监测中心、河南海瑞正检测技术有限公司、北京三元种业科技股份有限公司饲料分公司。

本文件主要起草人：张亚军、李贤、黄吉波、梁廷银、任泽林、王宏、姚婷、曹林、候林丛、邓露芳、刘晓玥。

1

T/CFIAS6006—2024

酿酒酵母培养物中甘露聚糖和β-葡聚糖含量的测定高效液相色谱法

1范围

本文件描述了酿酒酵母培养物中甘露聚糖和β-葡聚糖含量测定的高效液相色谱法。

本文件适用于酿酒酵母培养物中甘露聚糖和β-葡聚糖含量的测定。

本文件中甘露聚糖和β-葡聚糖检出限为30mg/kg,定量限为100mg/kg。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T20195动物饲料试样的制备

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4原理

试样中的甘露聚糖和β-葡聚糖经水解，生成单糖甘露糖和葡萄糖，对两种单糖衍生后，使用三氯甲烷去除衍生试剂，上高效液相色谱仪测定，外标法定量。

5试剂或材料

除非另有规定，仅使用分析纯试剂。

5.1水：GB/T6682,一级。

5.2盐酸。

5.31-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)。

5.4三氯甲烷。

5.5乙腈：色谱纯。

5.6氢氧化钠溶液(400g/L):称取40g氢氧化钠，用水溶解，待冷却至室温后，用水稀释至100

mL。

5.7PMP甲醇溶液(0.5mol/L):称取0.871gPMP,加入10mL甲醇溶解，混匀。临用现配。

5.8氢氧化钠溶液(0.3mol/L):称取1.2g氢氧化钠，加水溶解并稀释至100mL,混匀。

5.9盐酸溶液(0.3mol/L):移取2.5mL盐酸(5.2),加水溶解并稀释至100mL,混匀。

5.10盐酸溶液(1+3):移取25mL盐酸(5.2),加75mL水，混匀。

5.11乙酸铵溶液(0.1mol/L,pH=5.5):称取7.708g乙酸铵，加水溶解并稀释至1000mL,用盐酸溶液(5.10)调节pH=5.5,混匀。

2

T/CFIAS6006—2024

5.12混合标准储备溶液(1mg/mL):称取甘露糖标准品(CAS号：3458-28-4,纯度≥99%)和葡萄糖标准品(CAS号：50-99-7,纯度≥98%)各0.1g(精确至0.0001g),置于同一个100mL容量瓶中，用水溶解并定容，混匀。2℃~8℃保存，有效期6个月。

5.13混合标准系列溶液：准确移取适量混合标准储备溶液(5.12)于容量瓶中，用水稀释定容，混匀，配制成待测物质量浓度分别为1μg/mL、10μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、300μg/mL和500μg/mL的标准曲线系列溶液。临用现配。

5.14微孔滤膜：0.45μm,有机系。

6仪器设备

6.1高效液相色谱仪：配有紫外检测器或二极管阵列检测器。

6.2分析天平：感量0.0001g。

6.3立式电热压力蒸汽灭菌锅。

6.4pH计：精度±0.01。

6.5涡旋混合器。

6.6水浴锅：70℃。

7试样制备

按照