《动物细胞培养和核移植技术》（第1课时）名师课件.pptVIP

2.2动物细胞工程2.2.1动物细胞培养和核移植技术昌都市第三高级中学李昌海动物细胞工程常用的技术手段：动物细胞培养技术、动物细胞核移植技术、动物细胞融合技术、生产单克隆抗体技术温故知新：植物细胞工程常用的技术手段有哪些？植物组织培养技术、植物体细胞杂交技术动物细胞培养技术是动物细胞工程的基础。一、动物细胞培养思考：概念中关键词有哪些？从动物机体中取出相关组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。1、动物细胞培养的概念取出、分散、单个、适宜、繁殖2、动物细胞培养过程：优教提示：可打开素材精品动画：动物细胞培养请同学们观察动物细胞培养过程示意图并讨论以下问题：①为什么一般选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？②对组织块进行剪碎的目的是什么？③要使碎块分散成单个细胞应该怎么处理？④细胞悬液中的细胞在生长中会出现什么现象？⑤要避免接触抑制让细胞继续分裂应怎么处理？⑥正常的细胞能无限分裂吗？如果出现能无限分裂的细胞则说明细胞发生了何种变化？答疑解惑：动物胚胎或幼龄动物的组织、器官的细胞分化程度低，增殖能力强，分裂旺盛，容易培养。①为什么一般选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？②对组织块进行剪碎的目的是什么？增大组织块与外界溶液的接触面积。细胞贴壁：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。④细胞悬液中的细胞在生长中会出现什么现象？利用酶的专一性，使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理碎块，得到单个细胞。分散的单个细胞容易摄取所需的营养物质，排出代谢废物。③要使碎块分散成单个细胞应该用什么处理？细胞贴壁图示接触抑制：细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再增加。接触抑制接触抑制继续用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理成单个细胞，再分瓶培养。⑤要避免接触抑制让细胞继续分裂应怎么处理？⑥正常的细胞能无限分裂吗？如果出现能无限分裂的细胞则说明细胞发生了何种变化？正常细胞一般只能分裂50-60次左右，随分裂次数的增加，增殖会逐渐缓慢直至停止，此时细胞保持正常二倍体核型。传代培养中会出现部分细胞获得不死性，朝着等同于癌细胞的方向发展，这些细胞的细胞核型发生改变。什么是原代培养、传代培养？为什么要进行传代培养？原代培养：初次培养（分瓶前的培养）传代培养：继续培养（分瓶后的培养）进行传代培养的原因：解除接触抑制原代培养传代培养3、动物细胞培养条件:（1）无菌、无毒的环境添加一定量的抗生素，定期更换培养液（2）营养糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。（通常还需加入动物血清、血浆等天然成分）（3）温度和pH温度：36.5±0.5℃,PH:7.2~7.4（4）气体环境：O2和CO2（95%空气和5%CO2）动物细胞培养和植物组织培养的区别4、动物细胞培养的应用（1）获得细胞产物，如蛋白质生物制品－病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等；（2）获得烧伤病人植皮所需的细胞；（3）获得细胞用于检测有毒物质；（4）为治疗及预防疾病提供理论依据。课堂巩固点击随堂训练中的课堂训练-《动物细胞培养和核移植技术》（第1课时），用答题卡测试一下对知识的掌握情况吧！课堂小结：特点：1、概念：贴壁生长，接触抑制动物组织胰蛋白酶剪碎单个细胞加培养液细胞悬液分瓶培养10代细胞50代细胞不死细胞原代培养传代培养适宜条件3、培养条件：4、应用无菌无毒，营养，温度、PH，气体环境2、过程从动物机体中取出相关组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。课后作业完成课本“思考与探究”的1和2题。（p50）