高中生物选修三知识点归纳.pdfVIP

选修3复习提纲

一、基因工程

1、（a）基因工程的诞生

（一）基因工程的概念

基因工程是指依据人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转

基因技术，给予生物以新的遗传特性，创建出更符合人们须要的新的生物

类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫

做DNA重组技术。

2、（a）基因工程的原理与技术

原理：基因重组

技术：（一）基因工程的基本工具

1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）

（1）来源：主要是从原核生物中分别纯化出来的。

（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每

一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一

性。

（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末

端和平末端。

2.“分子缝合针”——DNA连接酶

(1)两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和TDNA连接酶）的比较：

4

①相同点：都缝合磷酸二酯键。

②区分：E·coliDNA连接酶来源于T噬菌体，只能将双链DNA片段互补

4

的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而TDNA连接酶能缝合两种末端，

但连接平末端的之间的效率较低。4

(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核

苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末

端，形成磷酸二酯键。

3.“分子运输车”——载体

（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至

多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③具有标记基因，供重组DNA的

鉴定和选择。

（2）最常用的载体是质粒,它是一种袒露的、结构简洁的、独立于细菌染

色体之外，并具有自我复制实力的双链环状DNA分子。

（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒

(二)基因工程的基本操作程序

第一步：目的基因的获得

1.目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。

2.原核基因实行干脆分别获得，真核基因是人工合成。人工合成目的基因

的常用方法有反转录法_和化学合成法_。

3.PCR技术扩增目的基因

（1）原理：DNA双链复制

（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；其次步：冷却到55～60℃，

引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶

从引物起始互补链的合成。

其次步：基因表达载体的构建

1.目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使

目的基因能够表达和发挥作用。

2.组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因

（1）启动子：是一段有特别结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA

聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋

白质。

（2）终止子：也是一段有特别结构的DNA片段，位于基因的尾端。

（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而

将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。

第三步：将目的基因导入受体细胞_

1.转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定

和表达的过程。

2.常用的转化方法：

将目的基因导入植物细胞：采纳最多的方法是农杆菌转化法，其次还有

基因枪法和花粉管通道法等。

将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术。此方法的受

体细胞多是受精卵。

将目的基因导入微生物细胞：

3.重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标

记基因是否表达。

第四步：目的基因的检测和表达

1.首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是

采纳DNA分子杂交技术。

2.其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是采纳用标记的目

的基因作探针与mRNA杂交。

3.最终检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋

白质，用相应的抗体进行抗原－抗体杂交。

4.有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如转基因抗虫植物是否出现抗

虫性