乳腺癌中TK1的表达与临床价值研究及分析.docx

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乳腺癌中TK1的表达与临床价值研究及分析

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【摘要】目的：研究与分析乳腺癌中胸苷激酶1（TK1）的表达与临床价值。方法：选取我院收治的50例乳腺癌患者为对象进行研究。通过对其全部的临床资料进行回顾性分析，所有患者均采用常规HE染色检查乳腺癌组织标本，明确其临床分期、病理特点、组织学类型等，并对乳腺癌组织中的TK1、Ki-67、c-erbB-2、p53、PR、ER的表达情况采用免疫组化MaxVsion法进行检测。结果：TK1阳性表达主要存在于乳腺癌组织的细胞质中，也有部分存在于细胞核中。50例患者中，其TK1阳性率为90.0%（45/50），而在TNM分期与组织学分级中，TK1表达对比差异非常显著，且P0.05具有统计学意义。Ki-67（r=0.867）与TK1表达呈正相关；而TK1与PR表达（r=-0.385）、ER表达（r=-375）呈负相关。结论：乳腺癌中TK1的表达在不同TNM分期与组织学分级中存在差异，TNM分期以及组织学分级越高，则TK1表达越高，因而在反应乳腺癌细胞增殖方面，TK1的灵敏度较高，。而乳腺癌中TK1的表达也与PR、ER、Ki-67存在一定相关性，即PR、ER表达水平越低，Ki-67阳性率越高，则TK1的表达水平也越高。

【关键词】乳腺癌；胸苷激酶1；免疫组化；临床价值

胸苷激酶（TK）在以镁离子参与，ATP为供体的前提下，其能将胸腺嘧啶脱氧核苷（TdR）逐渐催化为脱氧-1-磷酸胸苷酸（dTMP），而dTMP是DNA补救合成途径中不可或缺的重要原料【1】。胸苷激酶具有两种同工酶，但只有与细胞增殖周期相关含量的胸苷激酶1可作为细胞增殖的标记物【2】。据有关临床研究显示，在肠癌、子宫颈癌、肺癌、乳腺癌中，TK1的表达与肿瘤危险程度存在一定关系，而其在乳腺癌中的表达水平与该肿瘤的恶性程度呈相关，且对此类乳腺癌患者的预后也存在一定的影响【3】。因此本文对乳腺癌中胸苷激酶1（TK1）的表达与临床价值进行了研究与分析，现具体报道如下：

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一般资料与方法

1.1一般资料

选取我院收治的50例乳腺癌患者为对象进行研究，均为女性，且均以乳腺肿块确诊。所有患者年龄为24-75岁，平均年龄为（48.23±4.27）岁。

1.2方法

通过对其全部的临床资料进行回顾性分析，所有患者均采用常规HE染色检查乳腺癌组织标本，明确其临床分期、病理特点、组织学类型等，并对乳腺癌组织中的TK1、Ki-67、c-erbB-2、p53、PR、ER的表达情况采用免疫组化MaxVsion法进行检测。具体为：（1）经手术将标本切除，重点取材肿瘤组织，并以10%福尔马林固定标本，常规HE染色检查，并于光镜下进行观察。（2）免疫组化MaxVsion法：采用购自于福州迈新公司的Ki-67、c-erbB-2、p53、PR、ER等一抗单克隆即用型抗体；华瑞同康公司的多克隆抗体鼠抗人TK1。将组织标本采用石蜡包埋，并进行4μm厚连续切片，经梯度乙醇、二甲苯脱蜡水化；然后放置于柠檬酸组织抗原修复液（pH=6.）中煮沸15min，保温20min；将容器采用冷水冲洗至室温；采用PBS清洗3次，3min/次；采用3%双氧水于室温下滴加50μL，并孵育10min，之后采用PBS清洗3次，3min/次；然后采用一抗TK1滴加后，在37摄氏度下孵育60min，采用PBS清洗3次，3min/次；只有将二抗快捷型酶标羊抗鼠/兔IgG聚合物滴加进去，在37摄氏度下孵育60min，采用PBS清洗3次，3min/次；然后进行染色，采用新鲜配制的DAB，洗涤时采用蒸馏水，复染采用苏木精，返蓝采用自来水，脱水采用梯度乙醇，采用二甲苯使其透明，最后采用中性树胶进行固封。

1.3观察指标

（1）根据乳腺癌组织学分级（半定量评估法）对常规病理检查结果进行判断，主要分为三级，即G1、G2、G3。（2）采用双盲法评估免疫组化结果。胞质、胞核、胞膜无着色为阴性结果；胞质、胞核、胞膜附着有棕褐色或者棕黄色颗粒，即为阳性结果。而细胞核染色说明Ki-67、p53、PR、ER为阳性；而细胞质染色说明TK1为阳性。在每张切片上，随机选择高倍视野3个，阳性染色百分率以显微镜下计数100个细胞进行计算。阳性细胞数0-5%则为（-）、5%-25%则为（+）、25%-50%则为（++）、≥50%则为（+++）。细胞膜染色则为c-erbB-2阳性，参照《乳腺癌HER2检测指南》对染色结果进行判读：无着色为（0）、所有浸润癌细胞细胞膜呈不完整、微弱着色为（+）、10%浸润癌细胞细胞膜呈不均匀、完整、弱-中强度棕黄色着色，或者30%、呈完整且强的棕褐色着色为（++）、30%浸润癌细胞细胞膜呈完整、强的棕褐色着色为（+++）。