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四个阶段：

一、以导致遗传病的基因突变位点为靶标，以DNA分子杂交为核心

二、以PCR技术为核心

三、以生物芯片为核心

四、以DNA测序技术为核心

广义：分子标志物包括基因组DNA、各种RNA、蛋白质和各种代谢物

临床分子生物学检验靶标主要以核酸（DNA和RNA）为主

基因组DNA是临床分子生物学检验中最常用的分子靶标

病原生物基因1。菌种鉴定：PCR—测序和PCR—DNA探针杂交；缩短检测时间

2.确定病毒感染和病毒载量：明确感染源，判断病情，监测疗效

3.病毒分析:基因型变异产生不同临床症状

4.细菌耐药监测和分子流行病学调查:随机扩增多态性DNA；指导选择

治疗方案，控制病原菌的感染传播

基因变异1。致病基因的分子缺陷2。线粒体基因突3。肿瘤相关基因

单基因病1.致病基因结构发生了改变，影响了编码产物量和质的改变,如血红蛋白病、

血友病、Duchenne肌营养不良等。

2.致病基因中核苷酸三联体重复序列发生高度扩展，如脆性X综合征、亨廷

顿病、强直性肌营养不良等。

基因多态性用于:1。基因定位和疾病相关性分析2。疾病诊断和遗传咨询3.多基因病

的研究4.器官移植配型和个体识别

循环游离核酸检测（包括游离DNA和游离RNA）用于：产前诊断、恶性肿瘤早期诊断、

病例检测

临床分子生物学检验技术以分子杂交技术、PCR技术和DNA测序技术、芯片技术、双

向电泳技术、生物信息学技术为主要技术

分子生物学检验技术可用于微生物感染的确诊、感染性病原体的分型、耐药监测.

分子生物学检验技术有利于临床上对遗传性疾病的早期预防、早期诊断、早期治疗。

重要国际生物信息中心：1.美国国立生物技术信息中心（NCBI）2.欧洲生物信息学研

究所（EBI）3.日本国立遗传研究所（DDBJ）

一级核酸数据库有GenBank、EMBL和DDBJ；

蛋白质序列数据库有SWISS-PROT、PIR、UNIPROT等。蛋白质X射线晶体三维结构数据

库有PDB等.

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蛋白质数据库常用的有SWISS-PROT、PIR、PDB数据库。

二级数据库非常多，如人类基因组图谱库GDB、转录因子和结合位点库TRANSFAC、蛋

白质结构家族库SCOP等。

＊*乙型肝炎病毒核酸的检测常用技术：1。普通PCR技术2。荧光定量PCR技术3。

支链DNA技术4.核酸杂交技术5。杂交捕获系统6.基因芯片技术

＊＊HBV基因分型的方法：1，PCR—RFLP2.PCR-RBD3.ELISA4.基因芯片

人乳头瘤病毒基因组结构：HPVDNA为一双链闭环分子，基因组可分三个区段：早

期区（E）、晚期区（L）、长控制区或上游调节区或非编码区。

*＊*HPVDNA检测及基因分型:

1。核酸杂交技术（主要包括核酸印迹、原位杂交、杂交捕获等技术。目前常采用HC

Ⅱ技术、核酸分子杂交与PCR相结合的方法.具有较强的特异性，并可分型）

2。PCR技术*＊

（采用型特异性引物进行HPV快速分型，现已成为HPV感染最常用的检测方法之一。

目前常用通用引物—PCR（GP-PCR）和实时定量PCR。1。GP—PCR，依据不同HPV亚

型有共同保守序列的特点来设计通用引物,可广谱扩增HPVDNA，具有较高的敏感性,可

检测出10—400拷贝的HPV病毒含量。在GP—P