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生物化学实验

生物化学实验

一、糖的颜色反应及还原作用

实验一：糖的颜色反应

实验1.1莫氏实验

一、目的

掌握莫氏（molisch）实验鉴定糖的原理和方法。

二、原理

糖经浓无机酸（浓硫酸、浓盐酸）脱水产生糠醛或糠醛衍生物，

后者在浓无机酸作用下，能与α-萘酚生成紫红色缩合物，在糖液和浓

硫酸的液面间形成紫环，因此又称“紫环反应”，其反应如下图：

利用这一性质可以鉴定糖。

三、实验器材

1、棉花或滤纸。

2、吸管1.0ml(*4)、2.0ml(*1)。

3、试管1.5*15cm(*4)。

四、实验试剂

1、莫氏试剂：称取α-萘酚5g，溶于95%乙醇并稀释至100ml。

此试剂需新鲜配置，并贮于棕色试剂瓶中。

2、1%蔗糖溶液：称取蔗糖1g，溶于蒸馏水并定容至100ml。

3、1%葡萄糖溶液：称取葡萄糖1g，溶于蒸馏水并定容至100ml.

4、1%淀粉溶液：讲1g可溶性淀粉与少量冷蒸馏水混合溶液合成

薄浆状物，然后缓缓倾入沸蒸馏水中，边加边搅。最后以沸蒸馏水稀

释至100ml。

五、操作

于4支试管中，分别加入1ml1%葡萄糖溶液、1%蔗糖溶液、1%

淀粉溶液和少1，摇匀，讲试管2滴1ml水中）。然后各加莫氏试剂

许纤维素（棉花或滤纸浸在倾斜，沿管壁慢慢加入浓硫酸1.5ml(切勿

振摇！)硫酸层沉于试管底部与糖溶液分成两层，观察液面交界处有无

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紫色环出现。

六、注意事项

1、试管中加入各种糖后，应做好标记，浓硫酸加入的方式应保持

一致。

2、莫氏反应非常灵敏，所用的试剂应洗净，不可再样品中混入纸

屑等杂物。

3、当糖浓度过高时，由于浓硫酸对他的焦化作用，将呈现红色及

褐色而不呈现紫色，需稀释后再做。

思考题：

1、解释α-苯酚反应的原理。

2、用莫氏试验鉴定糖时需注意哪些？

试验1.2塞氏试验

一、目的

掌握塞氏（Seliwanoff）实验鉴定酮糖的原理和方法。

二、原理

酮糖在浓酸的作用下，脱水生产5-羟甲基糠醛，后者与间苯二酚

作用，呈2，以果红色反应，有时亦同时产生棕色沉淀，此沉淀溶于乙

醇，呈鲜红色沉淀糖为例，其反应如下：

三、实验器材

1、吸管0.5ml(*3)、5.0ml(*1)。

2、试管1.5cm*15cm（*3）。

3、水浴锅。

四、实验试剂

1、塞氏试剂：溶50mg间苯二酚于100ml盐酸中

[V(HO):V(HCl)=2:1],临用2时配制。

2、1%果糖溶液：称取果糖1g，溶于蒸馏水并定容至100ml。

3、1%葡萄糖溶液：见实验1.1。

4、1%