DB45T 2866—2024灵芝菌种制备技术规程.docx

ICSCCS

65.020.99B39

45

广西壮族自治区地方标准

DB45/T2866—2024

灵芝菌种制备技术规程

TechnicalcodeofpracticeforpreparationofGanodermastrain

2024-06-28发布2024-08-01实施

广西壮族自治区市场监督管理局发布

目次

前言 II

1范围 1

2规范性引用文件 1

3术语和定义 1

4菌种生产 1

4.1品种及菌种的选择 1

4.2菌种制备环境 1

4.3设施设备 1

5母种制作 2

5.1培养基 2

5.2容器要求 2

5.3培养基分装及灭菌 2

5.4菌种扩繁 2

5.5母种要求及入库 2

6原种和栽培种生产 3

6.1容器要求 3

6.2培养基制作 3

6.3灭菌 3

6.4接种 3

6.5培养 3

6.6原种、栽培种要求及入库 3

7菌种检验 4

7.1杂菌检验 4

7.2害虫检验 5

8生产档案 5

附录A（资料性）常用培养基及配方 6

A.1母种培养基 6

A.2原种、栽培种培养基 6

A.3检验培养基 6

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由广西壮族自治区农业农村厅提出、归口并宣贯。

本文件起草单位：广西壮族自治区农业科学院。

本文件主要起草人：王灿琴、韦娇君、胡秀月、韦仕岩、王晓国、蓝桃菊、罗阳兰、吴圣进、陈雪凤。

灵芝菌种制备技术规程

1范围

本文件确立了灵芝菌种制备的程序，规定了菌种生产、母种制作、原种和栽培种生产、菌种检验等阶段的操作指示，描述了描述了制备过程信息的追溯方法。

本文件适用于广西行政区域内紫芝、赤芝等菌种的制备。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB4806.7食品安全国家标准食品接触用塑料材料及制品

GB5749生活饮用水卫生标准GB/T12728食用菌术语

NY/T528食用菌菌种生产技术规程NY/T1731食用菌菌种良好作业规范NY/T1742食用菌菌种通用技术要求

3术语和定义

GB/T12728界定的术语和定义适用于本文件。

4菌种生产

4.1品种及菌种的选择

应选择出芝整齐、抗逆性强、产量高且稳定的品种，菌种应从具有资质的供种单位购买，其质量应符合NY/T1742的规定。

4.2菌种制备环境

应符合NY/T528的规定。

4.3设施设备

主要设施包括搅拌室、配料室、灭菌室、冷却室、接种室、培养室（通风、可控温）。主要设备包括电子秤、搅拌机、装袋机、高压灭菌锅、超净工作台或接种箱、空调机、除湿机、培养架、恒温培养箱、冰箱、显微镜等。

5母种制作

5.1培养基

参见附录A。

5.2容器要求

母种选用试管作为容器，规格为18mm×180mm或者20mm×200mm；组织分离或纯化选用培养皿，规格直径为90mm或60mm。

5.3培养基分装及灭菌

5.3.1培养基试管分装及灭菌

分装培养基至试管的1/5～1/4，用硅胶塞封口，顶端胶塞长40mm～50mm。每5支试管扎成一捆，用消毒过的牛皮纸包住胶塞一头，用橡皮筋扎紧，胶塞一头朝上放入灭菌锅，在121.5℃~123℃(0.11MPa～0.12Mpa)下灭菌25min。灭菌后温度降至60℃左右摆斜面，斜面长度不超过试管长度的2/3，待培养基凝固并冷却后装进无菌聚丙烯袋备用。

5.3.2培养基灭菌及培养皿分装

培养基装入300mL～500mL三角瓶刻度的1/2处，用硅胶塞封口，在121.5℃~123℃(0.11MPa～0.12Mpa)下灭菌25min，待温度降至60℃左右，在超净工作台上将三角瓶里的培养基倒入无菌的玻璃或塑料培养皿内，倒入培养基的量占培养